В клинико-диагностических лабораториях находят применение методы,позволяющие с использованием простых коллоидных реакций выявлять изменения в белковом спектре сыворотки крови. Так как нарушение коллоидной устойчивости сыворотки под действием какого-либо реактива выражается сначала коагуляцией (склеиванием), а затем флокку-ляцией (осаждением), коллоидно-устойчивые пробы называют нередко коагуляционными, или флоккуляционными (коллоидно-осадочными).
Флоккуляция (коагуляция, осаждение) наступает под влиянием двух основных факторов:
1) уменьшения электрического заряда коллоидных частиц;
2) увеличения размеров коллоидных частиц.
Флоккуляцию, вызванную частичной нейтрализацией электрического заряда коллоидных частиц добавлением к сыворотке электролитов, используют в пробе Вельтмана.
Преципитацию, достигаемую уменьшением гидратной оболочки белковых молекул, обычно вызывают действием ацетона, этанола.
Коагуляцию можно вызвать путем денатурации за счет нагревания, а также действия солей тяжёлых металлов и некоторых органических кислот.
|
|
Принцип метода. Реакция основана на флоккуляции белков нагреваемой до однократного вскипания сыворотки после предварительного добавления к ее раствору определенного количества хлористого кальция.
Реактивы
1. Раствор хлористого кальция – 5 г/л.
Ход определения. К 4,9 мл дистиллированной воды прибавляют 0,1 мл сыворотки, содержимое пробирки перемешивают путем её опрокидывания и затем приливают 0,1 мл раствора хлористого кальция. Содержимое пробирки встряхивают и нагревают над пламенем спиртовки до однократного закипания смеси. Затем пробирку охлаждают и смотрят через нее. Если хлопьев в ней не обнаруживается, то тогда добавляют еще 0,1 мл хлористого кальция и раствор вновь нагревают до кипения. Процедуру повторяют до выпадения хлопьевидного осадка.
При использовании сыворотки крови практически здоровых людей на такое добавление уходит 0,4-0,5 мл раствора хлористого кальция (показатель нормы).