Материалом для исследования служат испражнения больных в течение первой недели, смывы из носоглотки не позднее третьего дня, кровь, ликвор, моча не позднее пятого дня, сыворотка крови в первый и 14 дня; в случае смерти - кусочки мозга, внутренних органов, лимфоузлы. Материал берут в первые часы болезни, от трупа — не позднее чем через 3—4 ч после смерти.
Материалом для исследования служат кровь, сыворотка, содержимое везикул, асцитическая жидкость. От трупа берут на исследование кровь, спинномозговую жидкость, ткань спинного и продолговатого мозга, варолиева моста, кусочки кишок и их содержимое, кусочки печени, селезенки, легкого, поджелудочной железы, миокарда, лимфатические узлы.
Кровь (около 10 мл) для вирусологического анализа и приготовления сыворотки берут натощак в начале болезни, а затем спустя 3—4 недели.
Стул берут в пенициллиновые флаконы, эмульгируют в растворе Хэнкса, центрифугируют и добавляют эфир и антибиотики. Фекалии (4—6 г) собирают с интервалом 1—2 дня (можно использовать флаконы из-под антибиотиков). Готовят 10 % суспензию в растворе Хенкса, встряхивают и осветляют центрифугированием в течение 30 мин при 3000 об/мин (при возможности материал центрифугируют при 10 000 об/мин). Надосадочную жидкость обрабатывают эфиром (к осветленной суспензии фекалыий добавляют 50 % по объему диэтилового эфира, смесь оставляют в холодильнике под ватно-марлевой пробкой в течение 12-16 часов) и антибиотиками.
|
|
Ректальные тампоны помещают в пробирку с 1—2 мл раствора Хенкса или Эрла, споласкивают, отжимают. Материал центрифугируют и обрабатывают эфиром и антибиотиками.
Смывы из носоглотки получают путем двукратного полоскания горла стерильным физиологическим раствором хлорида натрия, освещают центрифугированием и обрабатывают эфиром и антибиотиками. Глоточный смыв в объеме 20 мл получают при 2-кратном (с интервалом 3 мин) полоскании горла стерильным солевым раствором или дистиллированной водой. Тампонами протирают заднюю стенку глотки, миндалины и небные дужки и погружают в пробирку с 1—2 мл раствора Хенкса. Материал центрифугируют и обрабатывают эфиром и антибиотиками.
Среднюю порцию мочи (10 мл) также обрабатывают пенициллином и стрептомицином. Кровь и ликвор используют для вирусологических исследований без предварительной обработки. Секционный материал эмульгируют в стерильных ступках с песком, готовят 20% суспензию в растворе Хэнкса, центрифугируют и добавляют антибиотики
Стерильную прозрачную спинномозговую жидкость (около 3 мл) используют для выделения вируса без предварительной обработки. Мутную спинномозговую жидкость, а также содержащую эритроциты центрифугируют. Мочу в объеме 10 мл берут в стерильный сосуд в середине акта мочеиспускания и обрабатывают антибиотиками.
|
|
Пробы секционного материала растирают в стерильной ступке, готовят 20 % суспензию в растворе Хенкса, центрифугируют 5—10 мин при 2000 об/мин.
Материал обрабатывают антибиотиками — пенициллином (1000 ЕД/мл) и стрептомицином (500 ЕД/мл) в течение 2 ч при комнатной температуре, а затем используют его для выделения вируса. Часть материала замораживают и хранят при температуре —70 °С. Многократное замораживание и оттаивание недопустимо, так как приводит к инактивации вируса.