Возбудители колибактериоза

Среда Кларка для определения интенсивности образования кислоты и ацетилметилкарбинола. 5 г пептона, 5 г глюкозы и 5 г двуосновного фосфата калия растворяют при подогревании на водяной бане в 80 мл дистиллированной воды. Пропускают через фильтровальную бумагу, охлаждают до 20⁰С, доводят дистиллированной водой до объема 1 л, разливают по 5 мл и стерилизуют при 0,5 ати 15 мин или дробно 3 дня подряд по 20 мин.

Раствор метuлрота. 0,01 г индикатора растворяют в 30 мл этилового спирта 96⁰-ного и добавляют 20 мл дистиллированной воды. Хранят в темном месте. Предназначается для добавления в среду Кларка с выращенной в ней культу­рой эшерихий.

Среда Козера. В 1 л дистиллированной воды растворяют 1,5 г кислого фос­форнокислого натрий-аммония (NaNH₄HP0₄·4H₂0), 1 г однозамещенного фос­фата калия, 0,2 г сульфата магния (MgS0₄·H₂0), 3 г нейтрального цитрата нат­рия (Nа3С6Н5SО7·2Н₂О). Полученный раствор пропускают через бумажный фильтр, разливают в пробирки и стерилизуют при 1 ати 20 мин. Готовая среда бесцветна и прозрачна.

Цитратный агар Симмонса. К среде Козера до ее фильтрования прибавляют 2% промытого агар-агара, нагревают до его расплавления, фильтруют в горя­чем состоянии через вату, охлаждают до 60⁰С, устанавливают рН 7,2 и добав­ляют 0,5% по объему индикатора бромтимолблау (его приготовление см. Среды для определения биохимической активности микробов). Готовая среда имеет тра­вянисто-зеленый цвет. Ее разливают в пробирки по 5-6 мл, стерилизуют при 0,5 ати 15 мин и перед употреблением скашивают. Эшерихии на среде не растут. При росте посторонних бактерий, утилизирующих цитрат, среда синеет. На эту среду пересевают только агаровые культуры Бульон с мочевиной. К 100 мл МПБ или бульона Хоттингера, рН 7,0, до­бавляют 1 г мочевины (карбамида) и 0,2 мл 1,6%-ного раствора крезолрота (индикатор), После перемешивания среду разливают в пробирки и стерилизуют текучим паром 3 дня по 15 мин. Цвет среды желтый. Посевы инкубируют при 37⁰С 4 суток. При расщеплении мочевины среда краснеет,

Агар с мочевиной. К 100 мл расплавленного стерильного 1,7%-ного марте­новского агара, рН 7,3, добавляют 0,5 г глюкозы, 2 мл 50%-ного раствора мо­чевины и 0,6 мл 0,4 %-ного раствора бромтимолблау. После перемешивания (и растворения глюкозы) среду разливают в стерильные пробирки по 5 мл и стерилизуют однократно текучим паром 15 мин. Хранят в столбиках и скаши­вают за 24 ч до засева. Среда имеет зеленоватый цвет, при расщеплении моче­вины становится ярко-синей, а при отрицательной реакций желтеет.

Бульон с глюкозой и сернокислым железом. В 1 л стерильного МПБ или бульона Хоттингера растворяют 0,2 г сернокислого железа (FeS04), 0,3 г тио­сульфата (гипосульфита) натрия, 1 г глюкозы, 12 мл 0,3%-ного водного раство­ра фенолрота (индикатор). После перемешивания бульон разливают в пробир­ки по 5 мл JI стерилизуют текучим паром однократно 20 мин.

Агар с глюкозой и сернокислым железом. В 1 л стерильного расплавленно­го 1,7-2%-ного МПА растворяют те же компоненты в указанных дозах. После перемешивания среду разливают в пробирки по 5-6 мл и стерилизуют так же. Накануне посева среду скашивают так, чтобы остался столбик высотой 3 см.