Схема ускоренного окрашивания гематоксилин-эозином, разработанная в МНИОИ им. П.А. Герцена Приготовление краски гематоксилин
Для окрашивания лучше всего пользоваться фирменными красителями, к которым обычно прилагается методика окрашивания
Методика окрашивания по Папаниколау
Тонкие мазки окрашивают по методике Н.Г. Алексеева
Срочное окрашивание по Н.Г. Алексееву
Окрашивание мазков по Лейшману Красители
1. Краска Лейшмана.
2,5 г сухой краски Лейшмана на 1 л метилового спирта. Краска созревает 3-4 дня.
2. Азур.
1 г сухой краски азур на 1 л дистиллированной воды. Краска созревает 3-4 нед.
3. Эозин.
1 г сухой краски эозин на 1 л дистиллированной воды. Краска созревает 3-4 нед. Ход окрашивания
1. Высушить мазок на воздухе.
2. Опустить в краску Лейшмана на 3 мин.
3. Промыть водопроводной водой.
4. Стряхнуть избыток воды.
5. Залить препарат краской в составе: азур - 40 мл; эозин - 30 мл; дистиллированная вода - 70 мл.
Краску готовят перед работой!
|
|
Мазки окрашивают в течение 30-40 мин.
6. Промыть водопроводной водой.
7. Высушить на воздухе или промокнуть фильтровальной бумагой.
1. Фиксируют в подогретом до 35-40°С растворе Мая-Грюнвальда в течение 30 с.
2. Ополаскивают водой.
3. Окрашивают в 0,1% растворе азур-эозина (в соотношении 2:1) в течение 2 мин.
4. Ополаскивают водой.
5. Промокают, высушивают.
Для окрашивания препаратов по методу Папаниколау обязательна влажная фиксация мазка. Мазок сразу же после получения, пока он еще влажный, фиксируют одним из перечисленных методов:
• специальными аэрозолями;
• каплевым фиксатором;
• в 96° спирте (10-20 мин);
• в смеси Никифорова (30 мин).
После этого высушивают на воздухе.
После окрашивания препарата его необходимо заключить в бальзам, для чего:
• погружают препарат в смесь ксилола и спирта (1:1);
• погружают препарат в ксилол;
• наносят каплю бальзама и покрывают покровным стеклом, избегая образования пузырей.
1. Растворяют 50 г алюмокалиевых квасцов [КАl(SО4)2 • 12Н2О] в 500 мл дистиллированной воды, доводят до кипения и всыпают в горячий раствор 1 г гематоксилина.
2. Добавляют 500 мл дистиллированной воды и доводят до кипения, но не кипятят!
3. Раствор остужают до комнатной температуры, прибавляют йодат калия (КIО3).
4. Марлей завязывают сосуд с краской и оставляют созревать на свету на 5 нед.
5. По истечении 5 нед сосуд закупоривают и убирают в темное место (например, шкаф). Перед употреблением краску профильтровывают.
1. Препарат фиксируют в смеси равных частей эфира и 96° этилового спирта (смесь Никифорова) или в одном 96° этиловом спирте в течение 7-10 мин.
2. Окрашивают гематоксилином в течение 5 мин.
3. Промывают в проточной водопроводной воде - 1-2 мин.
4. Окрашивают 0,3% спиртовым раствором воднорастворимого (желтоватого) эозина в течение 1 мин.
5. Промывают проточной водой - 1-2 мин.
6. Высушивают.