Клостридии перфрингенса

C l o s t r i d i u m p e r f r i n g e n s (Cl.welchii) открыли и описали в 1982 г Уэлч и Неттал. Микроб широко распространен в природе и встречается повсеместно, особенно большое количество его обнаруживают в почве, богатой гумусом. Патогенные штаммы микроба выделяются из почвы главным образом весной в местах, где почва загрязнена фекалиями животных. Основной резервуар сохранения патогенных клостридий – здоровые люди (выделяют у 25-35%) и животные, в кишечнике которых они размножается и выделяется с фекалиями во внешнюю среду.

В санитарной микробиологии количественный учет клостридий проводят при исследовании почвы, лечебных грязей, воды открытых водоемов.

Морфология. Cl. perfringens всех шести сероваров (А,В,С,D,Е,F) – неподвижные, грамположительные, довольно крупные толстые палочки длиной 4-8 и шириной 0,6-1,5 мкм. В препарате располагаются одиночно, парами, редко короткими цепочками. В организме животныхи человека микроб образует капсулу. Спорообразование может происходить в почве, кишечнике, пищевых продуктах богатых белком. Споры крупные, могут располагаться центрально и субтерминально

Культивирование. Cl. perfringens относится к нестрогим анаэробам. На среде Китта-Тароцци уже через 2-3 часа после посева он дает помутнение и появление пузырьков газа из под кусочков печени при встряхивании. Бурное газообразование происходит за счет сбраживания глюкозы и изомальтозы при расщеплении гликогена мышц или печени, находящихся в среде. Через 3-5 дней среда просветляется и на дно выпадает белый осадок. Культура издает неприятный запах масляной кислоты. На поверхности плотных питательных сред образуют колоний S- и R-формы. При росте на кровяном агаре с глюкозой через 12-18 часов возбудитель образует колонии в виде пуговиц, окруженных зоной гемолиза. Изолированные колонии в глубине агара имеют форму двояковыпуклых линз с гладкими краями в молодой культуре.

Для дифференциации клостридий фекального происхождения от клостридий, находящихся во внешней среде, применяют среду Вильсон-Блера. Клостридии кишечного происхождения, если их много, вызывают уже через 2-4 часа почернение всей среды, или образование черных изолированных колоний, при небольшой концентрации бактерий в посевном материале. Свободноживущие клостридии не изменяют цвет, так как не имеют сульфит редуктазы. О давности фекального загрязнения предложено судить по сопоставлению количества споровых и вегетативных форм Cl. perfringens. С этой целью определяют количество клостридий в непрогретых и прогретых пробах.

О давности фекального загрязнения судят по сопоставлению индекса E. coli и индекса Cl. perfringens. Высокое значение индекса Е. coli и низкое значение индекса Cl.perfringens указывают на давнее загрязнение. Если оба показателя имеют высокое значение, то это свидетельствует о свежем фекальном загрязнении.

Биохимические свойства. Cl. perfringens - самый нетребовательный из анаэробов, очень активный в биохимическом отношении и весьма патогенный.

Протеолитические свойства Cl. perfringens - свернутую сыворотку и вареные кусочки мяса разжижают медленно (на 2-7-й день). Однако у большинства серотипов А протеолитическая активность выражена в значительной степени, они вырабатывают ферменты, расплавляющие МПЖ через 24 ч. Молоко интенсивно свертывают с образованием губчатого сгустка уже через три часа, этот феномен известен как «штормовая реакция».

Гликолитические свойства – все штаммы сбраживают углеводы с образованием кислоты и газа. От прочих клостридий Cl. perfringens отличает способность восстанавливать нитраты, расщеплять лактозу, образовывать лецитиназу и не ферментировать маннит и дульцит.

Токсинообразование. Cl. perfringens вырабатывает как минимум 12 идентифицированных токсинов (ферментов) и энтеротоксин. Сложный состав экзотоксинов бактерий этого вида определяет разностороннее его повреждающее действие и спектр патогенности.

Устойчивость. Вегетативные клетки малоустойчивы, резистентность же спор, напротив, очень высокая. Имеются данные, что споры различных серотипов А и С более устойчивы и выдерживают кипячение и даже автоклавирование в течение 1-6 часов.

Патогенность. Основной возбудитель заболеваний человека – бактерии типа А. Для человека патогенны типы А, С и D; типы В, С, D и Е вызывают аналогичные заболевания у животных. Серотипы С выделяют из мясных и рыбных консервов и органов людей умерших от некротического энтерита. Все серовары Cl. perfringens способны вызывать газовую гангрену у человека и пищевые токсикоинфекции.

Cl. perfringens - типа А вызывает пищевые токсикоинфекции, типы С и F – некротические энтериты, а тип D - инфекционную энтеротоксемию.

В мясо и мясные продукты возбудитель проникает эндогенным и экзогенными путями, чаще всего этот микроб выделяется из продуктов вынужденного забоя, а также при различных болезнях животных.

Cl. perfringens типа А вызывает преимущественно токсикоинфекции легкой и средней степени тяжести. Заболевания развиваются остро, с болями в животе, рвотой и диареей. Летальные исходы наблюдаются редко – обычно у пожилых людей и ослабленных детей. Cl. perfringens типа С вызывает некротический энтерит.

Cl. perfringens можно выявить в специях, мясном фарше. При нарушении условий хранения пищевых продуктов количество Cl. perfringens уже за 3 часа может увеличиться в 10 раз. Чаще всего причиной вспышек токсикоинфекций, вызванных Cl. perfringens типа А, являются мясные продукты, выработанные с нарушением установленных требований гигиены и санитарии или хранившиеся при температурах выше +5⁰С, а также изделий из мяса птицы, свежей и соленой рыбы, реже молока и молочных продуктов, салатов и др. Инкубационный период обычно равен 6-24, а иногда – 2-3 часам.

Обязательным условием возникновения токсикоинфекций является накопление в пищевом продукте большого количества (в 1 г 10⁶) жизнеспособных бактерий. Энтеротоксин, образующийся в организме человека, увеличивает проницаемость кровеносных сосудов и вызывает усиление поступления жидкости в полость кишечника. Заболевания могут протекать в легкой и тяжелой формах. При первой форме изменения в желудочно-кишечном тракте небольшие, при второй - отмечаются резкие воспалительные и некротические процессы в кишечнике с явлениями острейшего гастроэнтерита.

В отдельных мясных продуктах (пастеризованные консервы) наличие Cl. perfringens не допускается - если хотя бы в одном из посевов обнаружены мезофильные клостридии Cl. perfringens и (или) Cl. вotulinum, консервы оценивают как не отвечающие требованиям промышленной стерильности.

Cl. perfringens типов Д и С вызывает энтеротоксемию овец, в желудке и кишечнике которых обнаруживают признаки острого катара. Убой таких животных на мясо запрещен: тушу, внутренние органы и шкуру уничтожают, а в помещениях проводят двукратную дезинфекцию с интервалом в 1 час 10%-ным горячим раствором едкой щелочи, 4%-ным раствором формальдегида.