2015-05-30
254
Реакцию ставят в узких пробирках. Обязательным условием правильной постановки является медленное наслаивание по стенке пастеровской пипеткой физиологического раствора и исследуемого термоэкстракта, пробирку при этом держат в наклонном положении. При правильном наслоении четко видна граница между двумя слоями жидкости. Реакцию учитывают через 5 мин.
Ксыв. – не должно быть кольцепреципитации (отсутствие спонтанной преципитации сыворотки); КАg – не должно быть кольцепреципитации (отсутствие спонтанной преципитации антигена). При таких контролях полученные результаты РП будут достоверными.
В случае положительной реакции на границе между сывороткой и исследуемым термоэкстрактом появляется преципитат в виде кольца белого цвета, при отрицательной реакции – кольцо отсутствует. Положительная РП свидетельствует о наличии в исследуемом экстракте антигена соответствующего антителам преципитирующей сибиреязвенной сыворотки, т. е. антигена возбудителя сибирской язвы; отрицательная РП свидетельствует об его отсутствии.
З а д а н и е №4
Учесть результаты реакции флоккуляции, поставленную с целью определения титра антитоксина по схеме:
| Ингредиенты | |||||
| Антитоксическая сыворотка, мл | 0,2 | 0,3 | 0,4 | 0,5 | 0,6 |
| Анатоксин (20 МЕ/мл), мл | |||||
| Результат |
Отметить наличие инициальной флоккуляции и рассчитать титр антитоксина. Оформить протокол (схема постановки, рисунок). Сделать заключение.
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
В результате взаимодействия токсина или анатоксина с антитоксической сывороткой выпадают хлопья флоккулята. Наиболее интенсивная («инициальная») флоккуляция происходит в пробирке, где антиген и антитело содержаться в эквивалентных соотношениях.
«Инициальная» флоккуляция проявляется в той пробирке, где количество токсина соответствует количеству международных единиц сыворотки. Например, флоккуляция произошла в 3-й пробирке, значит, в 0,4 мл сыворотки находится 40 МЕ. Следовательно, 1 мл сыворотки содержит 40:0,4 = 100 МЕ.
З а д а н и е №5
Изучить механизм и овладеть методикой оценки результатов реакции диффузной преципитации в геле для определения токсигенности дифтерийной палочки (Corynebacterium diphtheriae). Результаты оформить в виде рисунка с обозначениями.
