М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я. РСК является сложной двухэтапной серологической реакцией, в которой участвуют две системы антиген + антитело и комплемент

РСК является сложной двухэтапной серологической реакцией, в которой участвуют две системы антиген + антитело и комплемент. Первая система – основная, содержит антиген, антитело и комплемент. В случае образования комплекса антиген + антитело происходит активация и связывание комплемента, но визуально этого не видно. В качестве индикаторной системы используется вторая система, содержащая в качестве антигена эритроциты барана, а антитела – гемолитическую сыворотку, содержащую антитела к эритроцитам барана, т. е. готовый иммунный комплекс. Если антиген и антитело в первой системе соответствуют друг к другу, то образующийся комплекс активирует и связывает комплемент, поэтому при добавлении индикаторной системы гемолиза не происходит (РСК положительная). Если в первой системе антиген не соответствует антителу, то комплекс не образуется и комплемент остается свободным, активируясь и связываясь второй системой, вызывая при этом гемолиз эритроцитов (РСК отрицательная).

Результаты РСК предварительно учитывают после извлечения пробирок из термостата и окончательно – спустя 15-18 ч после пребывания их при комнатной температуре или в холодильнике.

Интенсивность реакции выражают плюсами:

++++ – реакция резко положительная, характеризующаяся полной задержкой гемолиза (эритроциты оседают на дно, жидкость бесцветная);

+++ – реакция положительная, характеризующаяся частичным гемолизом (лизировано ~ 25% эритроцитов, осадок меньше, жидкость розовая);

++ – реакция положительная, характеризующаяся гемолизом (лизировано ~50% эритроцитов, осадок небольшой, жидкость розовая);

+ – реакция сомнительная (лизировано ~75% эритроцитов, незначительный осадок, жидкость интенсивно окрашена);

– – реакция отрицательная (лизированы все эритроциты, жидкость интенсивно окрашена и прозрачна -лаковая кровь).

Положительная реакция с интенсивностью не меньше ++ при достоверных контролях свидетельствует о наличии антител и серологическом подтверждении клинического диагноза; отрицательная реакция при достоверных контролях свидетельствует о том, что антитела не выявлены и серологически клинический диагноз не подтвержден.

З а д а н и е №3

В бактериологическую лабораторию поступил исследуемый материал (отделяемое карбункула) от больного Р., клинический диагноз: «Сибирская язва. Кожная форма?». Учесть результаты прямой РИФ с отделяемым карбункула и люминесцирующей сибиреязвенной сывороткой. Зарисовать механизм реакции. Оформить протокол. Ответить на вопросы:

1. Какой метод диагностики применен?

2. Можно ли на основании РИФ поставить окончательный диагноз?