М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я. 1. Оценивают факторы неспецифической резистентности организма

1. Оценивают факторы неспецифической резистентности организма.

2. Подсчитывают лейкоцитарную формулу по общепринятой методике.

3. Подсчитывают количество Т- и В-лимфоцитов проводится в реакция Е- и ЕАС-розеткообразования (Е-РОК и КАС-РОК).

а) Е-розетки – комплексы, состоящие из Т-лимфоцитов человека и прилипающих к ним эритроцитов быка. Розеткообразующей считается клетка с тремя и более прилипающими эритроцитами.

б) ЕАС-розетки – комплексы, которые образуют В-лимфоциты с эритроцитами барана (Е), нагруженными антителами (А) и комплексами (С).

Учет результатов проводят подсчитывая количество розеткообразующих клеток на 100 лимфоцитов и выражают в процентах.

4. Определение уровней иммуноглобулинов разных классов в сыворотке крови методом радиальной иммунодиффузии по Манчини.

Три порции расплавленного 3%-ного агара смешивают в соотношении 1:1 соответственно с антиглобулиновыми сыворотками против IgM, IgG и IgА. Этими смесями покрывают три стеклянные пластины. В застывшем агаре каждой пластины делают лунки, в которые вносят по 0,2 мкл стандартной сыворотки с известным содержанием иммуноглобулинов трех классов (М, G и А): неразведенной, и в разведениях 1:2, 1:4, 1:6 и 1:8. В другие лунки каждой пластины вносят испытуемые сыворотки, взятые от обследуемых людей, в которых хотят определить содержание IgM, IgG и IgА. После суточного выдерживания во влажной камере при 4°С измеряют диаметры образовавшихся колец преципитации с разведениями стандартной сыворотки на каждой из трех пластин и строят калибровочные кривые, отражающие концентрацию IgM, IgG и IgА в этой сыворотке (d_зоны= f (СIg)). Затем измеряют диаметры колец с исследуемой сывороткой (на трех пластинах) и по калибровочным кривым определяют концентрацию IgM, IgG и IgА в сыворотках обследуемых.