Окраска включений, капсул и эндоспор, окраска по Граму

Цель: Изучить методы окраски спор, капсул и включений бактериальной клетки; изучить ее цитологические свойства на примере окраски по Граму.

Задачи:

1. Обнаружить включения полифосфатов (волютин) в клетках дрожжей.

2. Обнаружить липидные гранулы в клетках дрожжей.

3. Обнаружить гликогеноподобные полисахариды в клетках дрожжей.

4. Обнаружить капсулы бактериальной клетки методом негативного контрастирования (на примере Azotobacter).

5. Произвести дифференциальную окраску спор и цитоплазмы по методу Ожешки.

6. Произвести окраску бактерий по Граму.

Материалы и оборудование. Предметные стекла, бактериологическая пет­ля, спиртовка, фильтровальная бумага, кристаллиза­тор с мостиком для препаратов, промывалка с водой, микроскоп. Водные растворы красителей – фуксина, метиленового синего, генцианвиолета, карболовый фуксин Циля, судан III. Иммерсионное масло, серная кислота 1%, тушь, соляная кислота 0,5%, раствор Люголя. Культуры Вас.subtilis, Вас.mycoides, S.cerevisiae, E.coli.

Основные понятия. Муреин, волютин, нуклеоид, гликоген, капсулы, клеточная стенка, полисахариды, полифосфаты, метахроматические зерна, монотрихи, перетрихи, лофотрихи, бациллярная форма, клостридиальная форма, плектридиальная форма, экзина, интина, метахромозия.