Порядок выполнения работы. 2. Приготовить почвенную болтушку при разведении 1 : 100 000

1. Взвесить 1г. почвы;

2. Приготовить почвенную болтушку при разведении 1: 100 000;

3. Произвести посев в чашке Петри;

4. Заэтикетировать чашки Петри;

5. Поставить чашки Петри в термостат;

6. Произвести подсчет развившихся колоний;

7. Вычислить количество микроорганизмов в 1 г. почвы;

8. Произвести описание бактерий по культурным и морфологическим признакам;

9. Определить почвенные грибы по морфологическим признакам (до рода.

Вопросы для закрепления:

1. Какова микрофлора природной воды?

2. Какие показатели определяют при исследовании санитарного состояния воды?

3. Что называют микробным число воды? Как его найти?

4.Что такое тигр Coli?

5. Как определяют титр Coli способом мембранных ультрафильтров?

6.Как определяют титр Coli способом бродильных фильтров?

7.Что такое индекс Coli? Как его рассчитать по данным титрам?

8. Как определить микробное число воздуха'?

9. Какими способами можно взять пробы воздуха для микробиологического анализа?

10. Какие показатели определяют при исследовании воздуха?

11. Какова микрофлора воздуха? От каких факторов зависит число м.о. в воздухе и их
качественный состав?

12. Является ли воздух субстрактом пригодным для жизни микробов? Почему?

13. Какие условия благоприятствуют развитию различных форм микроорганизмов в почве?

14. Назовите наиболее типичных представителей микрофлоры почвы?

15. Как готовят почвенную болтушку различных разведений?

16. Как подсчитывается количество микроорганизмов в одном грамме почвы?

17. По каким признакам характеризуются выросшие колонии бактерий?

18. По каким бактериологическим показателям судят о санитарном состоянии воздуха?

19. Какие санитарно-показательные микроорганизмы используются для характеристики чистоты воздуха?

20. Опишите методы забора проб воздуха и его санитарную оценку?

21. Что такое микробное число воздуха?

22. Какой воздух считается чистым?

23. Как делают посев почвы по методу Холодного?

Домашнее задание: подготовиться к защите лабораторной работы.

Лабораторная работа № 11

Санитарно-бактериологические исследования почвы, воздуха, воды.

Учебная цель работы: привить навыки санитарно-бактериологических исследований почвы, воздуха и воды, подсчета выросших колоний микроорганизмов.

Материальное обеспечение: чашки Петри; пинцеты; пробы воды; микроскоп; бактериологические петли; лупа; предметные стела; покровные стекла; набор красителей для окраски по Грамму.

Организация и методика выполнения работы

1. Подсчет количества микроорганизмов в посевах воды.

После проведения посевов почвы, воздуха и воды, а также термостатировая посевов, проводим подсчет выросших колоний микроорганизмов, делаем мазки из наиболее характерных колоний и приступаем к подсчету, микроскопированию.

Отдельно подсчитывают колонии аэробных микроорганизмов на поверхности агара и анаэробных в его толще. Если колоний в чашке выросло много, можно для подсчета воспользоваться автоматическим счетчиком. Можно просчитать колонии в 20 квадратах сетки и определив среднее арифметическое количество колоний в 1 см² пересчитать на всю чашку по формуле:

М= Пr²n

где n - количество колоний бактерий в 1 см ²;

Пr²- площадь чашки Петри.

Колонии просчитывают в 2 чашках с посевом одной пробы воды и выводят среднее арифметическое. Определение микробного числа этим способом позволяет выявить лить те микроорганизмы, которые используют дня питания органический углерод и азот, и способны расти при указанных температурах. В основном это аэробные и факультативно-анаэробные гнилостные микроорганизмы. Могут быть обнаружены колонии актиномицетов, плесневых и дрожжевых грибов. Но этим способом совершенно не выделяются облигатно-анаэробные формы и микроорганизмы, способные к хемо- и фотосинтезу.