2015-06-14
620
Определения аконитина в трупном материале.
использованы материалы: «Методические указания. Об определении аконитина при судебно-химическом исследовании биологического материала» МЗ СССР г. Москва- 1976г.
ИЗОЛИРОВАНИЕ АКОНИТИНА ИЗ ВНУТРЕННИХ ОРГАНОВ
100 г тщательно измельчённого органа (желудок, кишечник, печень, почка) смешивают в стакане ёмкостью 300 мл со100 мл этанола, смесь подкисляют насыщенным спиртовым раствором шавелевой кислоты до рН 2,0 по УИБ и настаивают, при частом перемешивании, в течение 2 часов. Спиртовое извлечение отделяют центрифугированием при 5000 об/мин. В течение 10 мин. Надосадочную жидкость сливают в фарфоровую чашку, ткань органа смешивают со 100 мл этанола, проверяют реакцию среды (рН 2,0) и вновь настаивают в течение 2 часов. Извлечение аконитина рлдкисленным этанолом проводят три раза.
Объединённые спиртовые извлечения упаривают на термостатированной водяной бане (в термостате или с помощью вакуум-испарителя) при 650 до получения густого остатка (при наличии жира-до полного испарения спирта).
|
|
|
ПЕРВИЧНАЯ ОЧИСТКА АКОНИТИНА
Остаток тщательно обрабатывают горячей (90-950) водой (25 мл х3), выделившийся осадок отделяют центрифугированием. При наличии жира надосадочную жидкость отфильтровывают под вакуумом. Остаток в центрифкжном стакане заливают 50 мл воды, подкисленной щавелевой кислотой до рн2,0 настаивают, при перемешивании, в течение 15 минут., центрифугируют и надосадочную жидкость присоединяют к ранее полученной. Жидкость насыщают при рН 2,0 безводным натрия сульфатом и через 1 час экстрактивные вещества отделяют центрифугированием. Осадок в центрифужном стакане промывают 25 мл насыщенного раствора натрия сульфата, подкисленного щавелевой кислотой до рН 2,0 и отделяют центрифугированием.
Центрифугат (рН 2,0) извлекают эфиром два раза по 60 мл. Водную фазу подщелачивают 25% раствором аммиака до рН 8,0 и экстрагируют эфиром (60х2). Эфирные извлечения из щелочного раствора фильтруют через слой безводного сульфата натрия в делительную воронку (натрия сульфат промывают 10 мл эфира) и реэкстрагируют 0,1 Н. раствором соляной кислоты (15мл х 2). Реэкстракт подщелачивают 25 % раствором аммиака до рН 9,0 и экстрагируют эфиром (15 мл х 2). Эфирные извлечения фильтруют через небольшой слой безводного натрия сульфата, промывают 5 мл эфира. Эфир выпаривают при комнатной температуре досуха.
