Тяжелых металлов

Соли тяжелых металлов (Hg, Cu, Zn, Pb и др.) образуют связи с полярными группами белков, разрывают водородные, ионные связи, нарушают четвертичную, третичную и вторичную структуры белковых молекул.

Оборудование, реактивы:

Пробирки; белок яичный (1%-й раствор); сульфат меди CuSO₄ (1%-й раствор); ацетат свинца Pb(CH₃COO)₂ (5%-й раствор).

Порядок выполнения работы:

В четыре пробирки наливают по 0,5 мл раствора белка. В первую пробирку вносят четыре капли раствора CuSO₄, во вторую – 1 мл раствора CuSO₄. В третью и четвертую пробирки вносят соответственно 4 капли и 1 мл 5%-го раствора ацетата свинца.

При небольшой концентрации солей тяжелых металлов (пробирки 1 и 3) наблюдается образование осадка, который растворяется в избытке осадителя (явление адсорбционной пептизации).

При более высоких концентрациях солей наблюдается необратимое осаждение белков (пробирки 2 и 4).

Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами.

Концентрированные минеральные кислоты (азотная, соляная, серная) вызывают денатурацию белка, образуют комплексные соли белка с кислотами, происходит выделение осадка белка. Ортофосфорная кислота осадка не дает.

В избытке всех минеральных кислот, за исключением HNO₃, осадок растворяется. Качественная реакция с HNO₃ лежит в основе количественного определения белка по методу Робертса-Стольникова-Бредберга.

Оборудование, реактивы:

Пробирки; белок яичный (1%-й раствор); кислота серная (конц.); кислота азотная (конц.) или реактив Ларионовой.

Для приготовления реактива Ларионовой 20-30 г хлорида натрия растворяют при нагревании в 100 мл H₂O, к 99 мл фильтрата прибавляют 1 мл концентрированной HNO₃.

Осаждение белка азотной кислоты

(проба Геллера)

В пробирку наливают 0,5 мл азотной кислоты или реактива Ларионовой.

Осторожно, по стенке пробирки, наклоненной под углом 45⁰, наслаивают 0,5 мл раствора белка. На границе двух жидкостей образуется осадок белка в виде белого колечка, толщина и быстрота появления которого зависят от количества белка. Осадок не растворяется в избытке азотной кислоты.

Осаждение белка концентрированной

Серной кислотой.

В пробирку наливают 0,5 мл концентрированной серной кислоты. Наклонив пробирку под углом 45⁰, осторожно, по стенке пробирки, приливают 0,5 мл белка.

На границе двух слоев жидкости образуется белый осадок белка. При добавлении избытка серной кислоты осадок растворяется.

Осаждение белков трихлоруксусной