Выявление S. аureus

Из продукта или его смывов в солевой бульон проводят посев из исходного разведения или последующих 10-кратных разведений в соотношении к питательной среде 1:9. При этом при выделении S. аureus из 1 г продукта используют 10 см³ его первого разведения. Посевы инкубируют при температуре (37±1)°С в течение 18-24 ч, затем пересевают поверхностным методом на одну из агаризованных сред: агар Байрд-Паркер, яично-желточный солевой агар, яично-желточный азидный агар.

Посевы на агаризованных средах просматривают после 18—24 ч инкубирования при температуре (37±1)°С.

На среде Байрд-Паркер S. аureus растут в виде черных блестящих выпуклых колоний диаметром 1—1,5 мм, окруженных зоной лецитиназной активности в виде просветления среды шириной 1—3 мм вокруг колоний.

На яично-желточном солевом агаре и на яично-желточном азидном агаре колонии S. аureus белого и различного оттенка желтого цвета обычно с образованием вокруг колоний зоны лецитиназной активности.

Для подтверждения принадлежности обнаруженных колоний к S. аureus не менее чем из 5 колоний готовят мазки с окраской по Граму. При микроскопировании устанавливают колонии с мелкими собранными в гроздья грамположительными кокками. Из 5 колоний стафилококков проводят пересев на скошенный питательный агар. Посевы термостатируют при температуре (37±1)°С в течение 18—24 ч. Проверяют по мазкам, окрашенным по Граму, чистоту культуры выделенных стафилококков на скошенном агаре.

Выделенные чистые культуры стафилококков проверяют на способность коагулировать плазму крови кролика.

Для этого разведенную плазму крови кролика разливают по 0,5 см³ в стерильные пробирки. В нее вносят по петле анализируемых культур, оставляя одну пробирку с разведенной плазмой крови, не засеянной в качестве контроля. Внесенную культуру тщательно перемешивают и инкубируют при температуре (37±1)°С в течение 3—6 ч. Если через 6 ч коагуляции плазмы не произошло, то пробирки оставляют при температуре (30±0,5)°С на 24 ч. При отсутствии свертывания плазмы или появления отдельных нитей через 24 ч исследуемую культуру стафилококков относят к коагулазоотрицателельной. Реакцию считают положительной при образовании даже небольшого компактного сгустка. При получении положительной реакции плазмокоагуляции считают, что в посевах обнаружен S. аureus.