Живцями

Мета роботи: оволодіти методикою вегетативного розмноження рослин in vitro, яка базується на активації пазушних меристем.

Матеріали і обладнання: асептичні рослини картоплі, гвоздики або тютюну, стерильне середовище МС (у пробірках для рослин картоплі і гвоздики або баночках для рослин тютюну), стерильні чашки Петрі, скальпелі, пінцети, спирт, спиртівка, ламінар-бокс.

ХІД РОБОТИ

1. Пробірку з рослиною протерти спиртом і обпалити горло у полум’ї спиртівки.

2. Стерильним пінцетом витягти рослину-регенерант із пробірки, в якій вона росла і помістити її у стерильну чашку Петрі.

3. Підтримуючи рослину пінцетом, скальпелем порізати стебло на сегменти довжиною приблизно 10 мм так, щоб частина над брунькою становила 2-3 мм, а під нею - 5-7 мм. Обрізати листки. У верхівки рослини листки не обрізати.

4. Пінцетом перенести кожний сегмент у пробірку з живильним середовищем МС.

Пазуха листка має знаходитись над середовищем.

5. Культивувати при температурі 25⁰-28⁰С, освітленні 2-3 клк, 16-годинному фотоперіоді, відносній вологості повітря 70-75%.

6. Через 3-4 тижні з пазушних бруньок розвиваються рослини-регенеранти, які знову можна використати для розмноження живцюванням та інших цілей.

Робота 14. Стебловий органогенез із листкових дисків тютюну

Мета роботи: отримати рослини тютюну, регенеровані із листкових дисків.

Матеріали і обладнання: рослини тютюну, вирощені in vitro, баночки зі стерильним середовищем МС, чашки Петрі з середовищем МКР-1 (табл. 15), стерильні чашки Петрі, скальпелі, пінцети, спирт, спиртівка, парафілм, ламінар-бокс.

Таблиця 15