Количественное определение креатинина в моче

Креатитин образуется из креатининфосфата и является постоянной составной частью мочи. За сутки с мочой выделяется 1-2 г (8,8-17,6 ммоль) креатинина, что составляет 2-7% азота от всех азотсодержащих соединений мочи. Количество выделенного с мочой креатинина зависит от интенсивности процессов распада белков тканей организма и содержания креатинина в пище (его много в мясной пище).

Креатин Креатинфосфат Креатинин

Повышенное содержание креатинина в моче наблюдается при острых инфекциях, лихорадочных состояниях, у больных сахарным и несахарным диабетом. Моча здорового человека не содержит креатина, и выделение его с мочой свидетельствует о патологии поперечнополосатых мышц (миостения, мышечная дистрофия).

Принцип метода. Метод количественного определения креатинина в моче основан на цветной реакции Яффе с пикриновой кислотой с последующим определением интенсивности окраски на ФЭКе. Концентрацию креатинина в исследуемой моче находят по калибровочной кривой, выражающей зависимость окраски стандартных растворов от их концентрации.

Ход определения. В одну мерную колбу отмеривают 0,5 мл мочи, в другую – 0,5 мл дистиллированной воды (контрольная проба). В обе колбы добавляют по 3 мл насыщенного раствора пикриновой кислоты, смесь перемешивают, добавляют по 0,2 мл 10% раствора NaOH и доводят объем дистиллированной воды до 100 мл. Перемешивают содержимое колб, выдерживают в течение 10 мин при комнатной температуре и измеряют на ФЭКе оптическую плотность опытной пробы против контроля в кюветах с толщиной слоя 1 см со светофильтром (зеленый, длина волны 540 нм).

Зная оптическую плотность опытного раствора, по калибровачному графику определяют содержание креатинина в пробе, взятой для анализа, и расчитывают количество креатинина, выделенного с мочой за сутки по формуле:

где α- содержание креатинина в пробе с мочой, найденное по калибровочному графику, ммоль; V-объем мочи, взятой для анализа, мл; V_сут – суточный объем мочи, мл.