2015-10-16
677
| № | Реактивы и этапы | Опыт | Контроль |
| Субстрат для АсАТ или АлСТ, мл | 0,25 | 0,25 | |
| Физиологический раствор, мл | − | 0,05 | |
| Сыворотка крови, мл | 0,05 | − | |
| Инкубируют 60 мин при 37°С | |||
| 2,4-Динитрофенилгидразин, мл | 0,25 | 0,25 | |
| Перемешивают и оставляют на 20 мин при 20°С | |||
| Раствор NaOH, мл | 2,5 | 2,5 | |
| Через 10 мин фотометрируют против Н2О (λ= 500 нм, толщина кюветы 0,5 см). D500 | |||
| Dоп−Dк |
Расчёты
Расчет активности производят в мккат/л по калибровочному графику (данные для его построения приведены в таблице).
| Активность АлАТ или АсАТ, мккат/л | Dоп―Dк |
| 0,1 | 0,025 |
| 0,2 | 0,05 |
| 0,3 | 0,08 |
| 0,4 | 0,11 |
Норма: АлАТ= 0,05-0,12 мккат/л; АсАТ= 0,06-0,14 мккат/л. Верхний предел―0,42 мккат/л.
ЛАБОРАТОРНЫЕ РАБОТЫ ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ
НА ПРАКТИЧЕСКИХ ЗАНЯТИЯХ
Раздел IV. Обмен азотсодержащих соединений.
Тема 4.3. Источники и пути обезвреживания аммиака
В различных тканях.
Количественное определение аммиака по методу Мальфатти
|
|
|
Принцип метода состоит в том, что при действии формалина аммонийные соли мочи образуют уротропин и выделяется эквивалентное количество кислоты. Количественное содержание кислоты определяется титрованием.
Ход определения. В колбочку отмеривают пипеткой 10 мл мочи, добавляют отмеренные цилиндром 30 мл дистиллированной воды, 2 капли 1% раствора фенолфталеина и титруют при перемешивании 0,1н раствором щелочи до появления бледно-розового окрашивания. Затем к раствору добавляют 3-5 мл формалина, предварительно нейтрализованного раствором щелочи в присутствии фенолфталеина. Смесь обесцвечивается вследствие разложения аммонийных солей и появления кислот. Последние оттитровывают 0,1н раствором щелочи до появления бледно-розового окрашивания. Расчет производят по формуле: X = a × 0,0017 × 150, где Х – количество (грамм) аммонийных солей в суточном количестве мочи; а – количество (мл) 0,1н раствора щелочи, пошедшее на последнее титрование. Норма: 0,6-0,8 г.
ЛАБОРАТОРНЫЕ РАБОТЫ ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ
НА ПРАКТИЧЕСКИХ ЗАНЯТИЯХ
Раздел IV. Обмен азотсодержащих соединений.
Тема 4.4. Обмен глицина, серина, цистеина, метионина,
Триптофана, аргинина.
