2015-10-14
823
Реагенти:
Стандартні моноклональні антитіла (МКА): цоліклони анти-А (червоного кольору) і анти-В (синього кольору).
Спеціальне устаткування:
- Білі планшети або порцелянові (емальовані) тарілки.
- Скляні або пластмасові палички.
- Піпетки.
- Захисні рукавички.
Методика виконання:
- Визначення проводять у приміщенні з достатнім освітленням при температур і від+15до+25°С.
- Цоліклони анти-А і анти-В наносять на білий планшет або тарілку по одній великій краплі (0,1 мл) під відповідними написами: анти-А або анти-В.
- Поряд з краплями антитіл наносять по одній маленькій краплі (0,01 мл) досліджуваної крові у співвідношенні 1:10.
- Змішують окремими скляними паличками кожну краплю крові (еритроцитів) з відповідним Цоліклоном.
- Змішавши всі краплі, пластину погойдують, потім на 1-2 хв. залишають у спокої і знову погойдують. Аглютинація з Цоліклонами анти-А і анти-В починається в перші 3-5 секунд, спостереження за ходом операції проводять протягом 2,5 хв.
- Позитивний результат підтверджується наявністю аглютинації, появою невеликих червоних агрегатів, які швидко утворюють пластинки. Якщо результат негативний, аглютинація відсутня, крапля рівномірно профарбована у червоний колір.
|
|
|
Інтерпретація результатів:
Якщо аглютинація відсутня в усіх краплях - кров О(І) групи.
Наявність аглютинації з Цоліклоном анти-А при відсутності з Цоліклоном анти-В - кров А(II) групи, еритроцити містять тільки антиген А,
Наявність аглютинації з Цоліклоном анти-В при відсутності з Цоліклоном анти-А - кров В(III) групи, еритроцити містять тільки антиген В.
Наявність аглютинації з Цоліклоном анти-А і Цоліклоном анти-В - кров належить до IVгрупи, еритроцити містять обидва антигени А і В.
| Група крові, що досліджується | Цоліклони | |
| анти-В | антиА | |
| О(І) | - | - |
| А(ІІ) | - | + |
| В(ІІІ) | + | - |
| АВ(ІV) | + | + |
| *(-) -відсутність аглютиноцій, (+) - наявність аглютинацій |
Можливі помилки:
- Висока температура повітря (в нормі не більше 25°С).
- Використання вологих піпеток, пластинок, забруднених паличок.
- Використання недостатньо активних реагентів (слід стежити за терміном придатності реагентів, умовами зберігання реагентів).
- Низька якість реагентів (необхідно слідкувати за зовнішнім виглядом: прозорість реактиву, відсутність плівок, пластівців, запаху гниття та ін.).
- Технічні помилки (слід дотримуватись інструкції).
- Особливості досліджуваної крові (незрілість антигенних детермінант на мембрані еритроцитів новонародженої дитини).
