Идентификация
1. К 2 каплям раствора прибавляют 2 мл кислоты серной концентрированной. Образуется желтое окрашивание с легкой зеленой флуоресценцией.
2. К 5 каплям раствора прибавляют 1 мл раствора натрия гидроксида и 10 капель йода и нагревают. Ощущается характерный запах йодоформа.
Количественное определение
Количество раствора, содержащего 25 мг прогестерона помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и прибавляют хлороформ до метки, перемешивают (раствор А) 3 мл раствора А разводят хлороформом в мерной колбе вместимостью 50 мл (раствор Б). К 5 мл раствора (Б) прибавляют 10 мл раствора изониазида и метанол до получения 20 мл.
Через 45 минут измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре (или фотоэлектроколориметре) в кювете с толщиной слоя 10 мм в максимуме поглощения при длине волны 380 нм на фоне раствора сравнения, полученного смешиванием 5 мл хлороформа, 10 мл изониазида и метанола до общего объема 20 мл.
Параллельно проводят испытание с 0,003% стандартным раствором
прогестерона, начиная со слов «к 5 мл......».
Содержание прогестерона в растворе в % вычисляют по формуле:
где
Dх - оптическая плотность испытуемого раствора;
Dст - оптическая плотность стандартного раствора;
C0- концентрация стандартного раствора (0,003%);
а - навеска препарата, мл;
– разведение.
Содержание прогестерона в препарате должно быть 0,95%-1,05% (для 1% раствора) или 2,38% - 2,62% (для 2,5% раствора).
Раствор изониазида: 0,1 г изониазида растворяют в 150 мл метанола, прибавляют 0,12 мл кислоты хлороводородной концентрированной и разводят до 200 мл метанолом.