Определение сапонинов

Реакция пенообразования.

Растение грубо измельчают и в пробирке готовят извлечение 1:10 на дистиллированной воде, фильтруют. В одну пробирку помещают 5 мл фильтрата, а в другую – 5 мл дистиллированной воды (контроль). Обе пробирки энергично встряхивают. Содержащие сапонины настои при этом дают обильную пену, не исчезающую в течение длительного времени.

Реакция с раствором ацетата свинца

К 2 мл настоя прибавляют несколько капель ацетата свинца. Образуется осадок. Причем,

тритерпеновые сапонины осаждаются средним ацетатом свинца, а стероидные – основным.

Реакция Лафона

К 2 мл водного настоя прибавляют 1 мл концентрированной серной кислоты, 1 мл этило-

вого спирта и 10 капель 10% раствора сернокислого железа. При нагревании появляется

сине-зеленое окрашивание.

Определение сердечных гликозидов

Общая реакция на углеводный комплекс.

Готовят водный отвар из измельченного сырья 1:50. Отвар фильтруют, делят на две части

по 10 мл. К одной части отвара в колбе добавляют около 1 мл 10% раствора соляной ки-

слоты и кипятят 2-3 минуты (при этом происходит гидролиз предполагаемого гликозида, с

образованием агликона и сахарной части). К обеим частям отвара добавляют по 2 мл рас-

твора Фелинга (Фелинга I и Фелинга II), кипятят 3 минуты и сравнивают результаты в

обоих случаях. Появление кирпично-красного осадка в пробирке, где был проведен гид-

ролиз, указывает на присутствие гликозидов.

Реакция на пятичленное ненасыщенное лактонное кольцо (Реакция Балье)

5.0 г измельченного растительного сырья заливают двадцатикратным количеством 24%

спирта и оставляют на 4-5 часов при частом взбалтывании. После фильтрования прибав-

ляют насыщенный раствор ацетата свинца. Для осаждения избытка свинца добавляют на-

сыщенный раствор сульфата натрия, отстаивают и фильтруют. К 1-2 мл фильтрата добав-

ляют равный объем 1% раствора пикрата натрия. Если через 5-15 минут появится оранже-

вая окраска, это говорит о наличии сердечных гликозидов в данном сырье.

Пикрат натрия готовится по мере надобности смешением водных растворов 1% пик-

риновой кислоты (9 частей) и 10% раствора щелочи (1 часть). Смесь готовится в количест-

ве, необходимом для проведения анализа в течении одного дня.

Примечание: если в спиртово-водных извлечениях находятся моносахара, способ-

ные оказывать влияние на окраску раствора, то качественную оценку необходимо произ-

водить в интервале 5-20 минут, не позднее, иначе произойдет усиление окраски за счет

реакции пикрата натрия с сахаром.

Реакция на стероидное ядро (реакция Либермана-Бурхарда)

5 мл фильтрата, полученных в предыдущем опыте, помещают в выпарительную чашку и

выпаривают на спиртовке. Сухой остаток растворяют в 1 мл ледяной уксусной кислоты и

добавляют смесь уксусного ангидрида и концентрированной серной кислоты (5:1). Через

некоторое время появляется розовая окраска, переходящая сначала в зеленую, а затем в

синюю.

Определение полисахаридов

Приготовить водный отвар 1:10. К 5 мл отвара добавляют 15 мл этилового спирта. Нали-

чии осадка характеризует возможное присутствие слизи, пектиновых веществ или инулина.

Определение крахмала

1-2 г сырья растереть в ступке, прибавить 1-2 капли раствора Люголя. При наличие крах-

мала появляется сине-фиолетовое окрашивание.

Определение инулина

1-2 г сырья растереть в ступке, перенести в фарфоровую чашку и аккуратно по стенкам

добавить 20% раствора α-нафтола и концентрированной серной кислоты. Появляется

красно-фиолетовое окрашивание.