Работа 1. Приготовление влагалищных мазков мышей

1. На тупообрезанный и закругленный конец тонкой обструганной палочки наматывается небольшой слой ваты. Конец палочки с намотанным на нем ватным тампоном погружают в стаканчик с водой и вводят во влагалище самки мыши, палочку круговым движением слегка поворачивают во влагалище, а затем извлекают. Сразу после извлечения концом тампона в центре поверхности предметного стекла делают нужное число мазков.

2. Мазок подсушивают на воздухе, затем наносят несколько капель спирта - для лучшей фиксации и выждать время, чтобы спирт испарился.

3. На мазок наливают раствор метиленовой сини и окрашивают 10-15 минут. После этого слить избыток красителя и смыть слабой струей воды.

4. Готовые мазки рассматривают под микроскопом и определяют фазы полового цикла. 1 фаза - относительный покой (наличие лейкоцитов и присутствие в мазке слизи); 2 фаза - предтечка – (наличие крупных эпителиальных клеток); 3 фаза – течка (присутствуют ороговевшие безъядерные эпителиальные клетки в виде чешуек); 4 фаза – послетечка (присутствуют ядерные и безъядерные эпителиальные клетки).

РАБОТА 2. Физиологические свойства сперматозоидов.

1. Каплю спермы наносят пипеткой на предметное стекло прикрывают покровным стеклом и рассматривают под микроскопом, используя вначале малое, а потом большое увеличение.

2. Особое внимание обращается на внешнее строение, концентрацию и на подвижность сперматозоидов. В хорошей сперме не должно быть неподвижных сперматозоидов. Различают три типа движений: 1) поступательное движение - наиболее активный вид движений, когда сперматозоиды перемещаются быстро и прямолинейно - головкой вперед; 2) манежное движение - движение по кругу; 3) колебательное движение - сперматозоиды не перемещаются, а покачиваются вокруг своей оси.

РАБОТА 3.Влияние среды на подвижность сперматозоидов.

1. К капле спермы, под покровное стекло, добавляют каплю 1% раствора двууглекислой соды (на край стекла). Наблюдают за подвижностью сперматозоидов. Слабая щелочь усиливает подвижность. В организме самца сперма приобретает подвижность лишь при эякуляции, когда к сперме примешивается щелочной секрет добавочных половых желез.

2. К новой капле спермы добавляют 0,5% раствор соляной кислоты. Сперматозоиды прекращают движение и погибают.

3. К новой капле спермы добавляют 0,5% раствор едкого натра. Сперматозоиды также прекращают движение и погибают.

РАБОТА 4.Влияние на сперму дистиллированной воды,