От посева до ответа)
Сроки выделения микобактерий и определение
Разница в 2,68 раза
Сроки определения лекарственной чувствительности
Разница в 3,52 раза
Системы с использованием жидких питательных сред
Общие черты:
1. Автоматизированы полностью или частично
2. Ускоренное выявление роста бактерий (7-14дней) – по выделению СО2 или по поглощению кислорода
3. При выделении культуры из мокроты добавляют комплекс антибиотиков для задержки роста контаминантов, что делает среду селективной
4. Определение лекарственной чувствительности – к препаратам 1-го ряда, непрямым методом, с использованием критических концентраций (для каждой системы)
5. Ответ лаборатории (с момента получения мокроты)- через 2-4 недели (включая выделение культуры)
Сроки выделения культуры возбудителя туберкулёза
· Классический метод – 19-81 день (45,62)
· ВасtесТМ МGITTM 960 – 5-22 дня (12,95)
· Классический метод – 21-28 дней (22,75)
· BactecTM MGITTM 960 – 5-11 дней (8,49)
лекарственной чувствительности (полный анализ –
|
|
· Классический метод – 40-107 дней (68,44)
· ВactecTM MGITTM 960 – 17-35 дней (25,05)
Проблемы, снижающие эффективность микробиологической диагностики туберкулёза:
· Низкая выявляемость микобактерий
· Длительные сроки культурального исследования на микобактерии
· Отсутствие чётких критериев оценки лекарственной чувствительности микобактерий
· Слабая взаимосвязь между бактериологами и клиницистами.
Молекулярно – биологический метод
Генетический способ лабораторной диагностики
инфекционных болезней: полимеразная цепная реакция.
Этот метод основан на обнаружении участка ДНК искомого
микроорганизма, что даёт возможность обнаружить
труднокультивируемые микроорганизмы. Главное
преимущество ПЦР – высокая чувствительность, позво-
ляющая обнаружить 100 и менее микробных клеток в 1 мл.
Анализ может быть выполнен в течение 5-6 часов от момента
доставки пробы в лабораторию.
Молекулярно-генетические методы при туберкулёзе служат
для:
· Обнаружения микобактерий
· Идентификации вида
· «Паспортизирования» штаммов
· Изучения источника и путей передачи возбудителя
· Выявления лекарственной устойчивости
· Изучение распространения различных видов микобактерий в определённом регионе
«ТБ-БИОЧИП»
Среди молекулярно-биологических методов, позволяющих выявить мутации в ДНК М. tuberculosis, наиболее близким к внедрению в лабораторную практику является метод биологических микрочипов, разработанный в Институте молекулярной биологии (ИМБ) им. Энгельгардта, - «ТБ-БИОЧИП». С его помощью можно определять наличие микобактерий туберкулёзного комплекса и проводить одновременное определение резистентности М. tuberculosis к двум препаратам R и Н. Если в какой-либо из ячеек регистрируется больший флюоресцентный сигнал, чем в соответствующей контрольной ячейке, то анализируемый образец имеет точечную мутацию, и соответственно, выдаётся заключение, что в анализируемом образце обнаружены микобактерии туберкулёза, устойчивые к R и/или Н.
|
|
«ТБ-БИОЧИП-2»
С учётом важности быстрого определения чувствительности М. tuberculosis к фторхинолонам у больных туберкулёзом с МЛУ в Институте молекулярной биологии (ИМБ) была разработана новая тест-система «ТБ-БИОЧИП-2», позволяющая определять 9 типов мутаций в области гена gyrA M. tuberculosis (регион, определяющий устойчивость к фторхинолонам)
Метод микрочипов является:
· Эффективным (91,9% выявляемости M. tuberculosis и определения их лекарственной чувствительности с помощью «ТБ-БИОЧИП» и «ТБ-БИОЧИП-2»)
· Быстрым (время проведения анализа включая, обработку биологического материала, составляет 48 ч.)
· Одновременного определения ЛЧ к изониазиду, рифампицину и фторхинолонам
· Чувствительным – данные ЛЧ к исследуемым препаратам с помощью «ТБ-БИОЧИП» полностью совпали с данными, полученными при культуральном исследовании на плотных средах
· Доказана эффективность применения «ТБ-БИОЧИП-2» для контроля чувствительности М. tuberculosis с МЛУ к фторхинолонам до и в процессе лечения