Извлечение органа

Фиксация. Фиксатор выполняет следующую роль:

а) уплотняет ткань, а структуры объекта переводит в нерастворимое состояние, сохраняя их прижизненную форму;

б) увеличивает различие в преломлении света деталями объекта, благодаря чему выявляются те структуры, которые преломляют свет одинаково с окружающей их средой и поэтому при рассматривании в микроскоп невидимы.

Фиксатор должен легко и быстро пропитывать объект. Применяются простые и сложные фиксаторы. К простым фиксаторам относятся: фор­малин (40%- ный раствор формальдегида), этиловый спирт (от 40 до 100%), метиловый спирт, спирт в смеси с эфиром и т. д. Сложные фиксаторы приготовляются по особым рецептам, познакомиться с которыми можно в гистологических справочниках.

Промывание объекта. Некоторые фиксаторы закрепляют струк­туру объекта, но мешают другим процедурам приготовления препара­тов или образуют осадки, поэтому должны быть удалены из материала. Промывание обычно проводят в дистиллированной воде или в фосфатных буферах с определенными значениями рН.

Обезвоживание и уплотнение. После промывания из объекта долж­на быть удалена вода, которая будет в дальнейшем искажать структуру клетки. Для этого используют спирт, который поглощает воду.

Заливка объекта. В большинстве случаев зафиксированный и обезвоженный объект все же остается мягким и нежным. Из такого ма­териала сделать тонкие срезы невозможно. Поэтому его необходимо пропитать затвердевающими веществами. Такими веществами являются целлоидин и парафин. В гидробиологии часто используется глицерин-желатиновая заливка.

Изготовление срезов. Из залитого целлоидином или парафином объекта необходимо приготовить тонкие срезы. Обычно срезы делаются с помощью специальных приборов — микротомов. В гистологической технике чаще всего употребляются микротомы, которые делятся на сан­ные, или салазочные, и замораживающие.

Окрашивание срезов. Как отмечалось выше, при приготовлении гистологических препаратов большое значение имеет их окрашивание.

Поскольку разные структуры тканей и клеток окрашиваются разными красителями, в гистологической технике употребляются как основные, так и кислые красители. Гистологических красителей много, и выбира­ются они соответственно объекту и способам фиксирования.

Заключение срезов в бальзам или глицерин-желатин. На обезво­женный, окрашенный и просветленный срез наносят одну-две капли бальзама (канадский, пихтовый, кедровый), ребром покровного стекла осторожно касаются бальзама и, когда капля растечется по ребру, опус­кают его на объект. Парафиновые срезы обычно заключают в глицерин-желатин. После этого на покровное стекло помещают небольшой грузик. Препарат просушивается и на него наклеивается этикетка с названием объекта и с указанием красок, которыми он окрашен.

Срезы для электронной микроскопии используются однократно. При этом интересующие участки препарата фотографируются.

Из тканей жидкой консистенции (кровь, костный мозг и др.) изготавливают препарат в виде мазка на предметном стекло, который так же фиксируют, окрашивают, а затем изучают.

Из ломких паренхиматозных органов (печень, почка и др.) могут быть изготовлены препараты в виде отпечатка органа: после разлома или разрыва органа к месту разлома прикладывается предметное стекло, на которое приклеиваются некоторые свободные клетки. Затем препарат фиксируется, окрашивается и изучается.

Из некоторых органов (брыжейка, мягкая мозговая оболочка) или из рыхлой волокнистой соединительной ткани изготавливаются пленочные препараты путем растягивания или раздавливания между двумя стеклами, так же с последующей фиксацией, окраской и заливкой в смолы.

Цитология - это наука о клетке. Цитология изучает клетки животных и растений, а так же ядерно-цитоплазматические комплексы и бактерии.

Клетка – это наименьшая элементарная живая система, состоящая из цитоплазмы, ядра, оболочки и являющаяся основой развития, строения и жизнедеятельности животных и растительных организмов.

Основные положения клеточной теории:

1. Клетка является наименьшей единицей живого. Все живые существа животные и растения состоят из клеток.

2. Клетки различных тканей различных организмов разнообразны по форме, но схожи по своему химическому составу и имеют общий принцип строения.

3. Каждая клетка образуется в результате деления другой клетки.

4. Клетки являются частью целого организма. Они специализированны.