Серологические методы в диагностике инф-х забол-й

Серолог-й метод основан на р-ии АГ-АТ он примен-я для:

1) обнаружение с диагн-й целью АТ в сыворотке крови больного. В реак-и исп. заведомо известные АГ. При диагн-ки бактер-й инф-ии в качестве АГ примен-т взвеси жив. или убитых м/о- диагностикумы. При диагн-кие вирусн. инф-и исп.агглютинацию, амниотич. жидкость, суспензии желточн. мешков куриных эмбрионов, экстракт клеток тканевых культур, зараженных определен-и вирусами. Достоверные рез-ты серолог-й диагн-и получают при изучении парных сывороток крови больных, взятой в первые дни и ч/з разные промежутки времени. Можно наблюд-ть динамику нарастания АТ. При вирусн инф-х имеет диагн-е значение 4-ех кратное повышение титра АТ.

2) установление родовой, видовой и типовой принадлежности микроба или вируса. Неизвестным компонентом в р-ии явл-я АГ. Р-ию ставят с заведомо извест-и иммунными сыворотками. Для серолог. иссл-я кровь берут натощак из вены или из пальца. Кровь в кол-ве 5-6мл берут в стерильную пробирку, кот после получения пробы помещают на 0,5-1ч в термостат.

Серолог-е р-ии:

1)РА бактерий заключ-я в склеивании и выпадении в осадок бактерий из их взвеси. Проводят в робирках или на рпедметном стекле. В 1-ом случае сыворотку разводят методом 2-укратных разведений в пробирках; в эти пробирки вносят живую или убитую культуру микроба. Во 2-ом случае на стекло наносят каплю сыв-ки и в нее вносят культуру микробов. По хар-ру осадка опред-т выраженность р-ии. РПГА: если поисходит агглютинация эр., на поверхность кот адсорбированы АГ. РНГА: к эр. несущим на себе адсорбированный АГ, добавл-т иммунную сыв-ку. Выпадение фестончатого осадка (+), осадок в виде диска или колечка (-). РТГА основана на способности АТ иммун. сыв-ки нейтролизовать вирусы, кот в рез-те этого процесса не могут агглютинировать эр.

2)Р-ия преципитации (РП)- осаждение комплекса АГ-АТ, образ-ся в рез-те соединения раствор-го АГ со специфич-и АТ. РП ставят путем нанесения р-ра АГ на иммунную сыв-ку. При оптимал-м соотношении АГ и АТ на границе этих раств-в образ-ся непрозр-е кольцо преципитата.

3)РСК применяют для обнаружения АТ в сыв-ке бол-го и выявления АГ в выделениях бол-го. Мех-м р-ии связывания комплемента состоит в том, что АГ, соединившись с АТ, прочно удерживает комплемент. При добавлении гемолитич-й системы (эр барана+АТ к эр барана) гемолиза нет- р-ия(+). Если комплемент свободный. То намтупает гемолиз- р-ия (-).

4)РН (нейтролизации)- АТ иммунной сыв-ки способны нецтролиз-ть Дей-е м/о и их токсинов на чувствительн клетки. РН ставят путем введения смеси АГ-АТ, полученной in vitro, животным или внесения ее в культуру клеток. При отсутствии поврежд-го дей-ия м/о или АГ говорят о нейтрализ-м Дей-и иммунной сыв-ки. 5)ИФА- выявление АГ с помощью соответств им АТ, конъюгированного с ферментом (пероксидазой, щелочной фосфотазой). После соединения АГ с иммунной сыв-ой в смесь добавл-т субстрат, кот расщепляется ферментом с окрашиванием р-ра в желто-коричн или желто- зелен цвет- р-ия (+). 6)радиоиммунологич-й анализ (РИА) – один из комплементов, меченный радиоактивной меткой, выявляется с помощью специальных счетчиков. Для РИА исп иммунные сыворотки и меченные АГ.