Факторы интерференции на результаты количественной оценки CDT и способы их устранения

1. Факторы, ассоциированные с нарушениями условий взятия, хранения и транспортировки образцов.

К таким факторам, способным вызывать помехи на ЭФ профиле, препятствующие корректной количественной оценке CDT, относят:

- образцы с признаками гемолиза;

- старые, неправильно хранившиеся образцы;

- образцы плазмы или неправильно подготовленная сыворотка;

- образцы с ЭДТА или цитратом.

В случае интерференции по причине использования образцов ненадлежащего качества (Приложение 5, пример 5) требуется провести повторный анализ с вновь взятым, свежим и правильно подготовленным образцом сыворотки от того же обследуемого.

2. Факторы, ассоциированные с нарушением реологических свойств сыворотки.

В некоторых случаях образцы сыворотки могут содержать криоглобулины или криогель и/ или моноклональный белок (белок, синтезирующийся при ряде лимфопролиферативных заболеваний) и обладать повышенной вязкостью (особенно при хранении в замороженном состоянии). Такие образцы при проведении электрофореза могут формировать помехи в виде одной или нескольких дополнительных фракций на профиле или широкой фракции перед дисиалотрансферрином. Иногда может наблюдаться смещение электрофоретического профиля, что делает невозможным количественный анализ CDT.

Для предотвращения данного вида интерференции необходимо осуществлять осмотр образцов, поступающих на исследование, и в случае обнаружения повышенной вязкости сыворотки провести их предварительную обработку при помощи раствора для обработки проб в соответствии с Инструкциями по применению наборов реагентов для определения CDT на системах Capillarys или Minicap. Такую же обработку следует провести в случае уже обнаруженной интерференции перед повторным исследованием образца (Приложение 5, пример 6).

3. Факторы, ассоциированные с наличием генетических вариантов трансферрина.

В редких случаях у обследуемого могут быть выявлены генетические варианты трансферрина, которые затрудняют точную количественную оценку CDT. Однако в первую очередь следует различать истинные генетические варианты от «ложных».

«Ложный» вариант трансферрина может формироваться в случае длительного хранения образца сыворотки при комнатной температуре. Данное нарушение приводит к разрушению С3 компонента комплемента и появлению «ложного» пика тетрасиалотрансферрина, что может быть ошибочно принято за генетический вариант. Для снятия интерференции «ложного» варианта следует повторить исследование на свежем, правильно подготовленном образце сыворотки.

Истинные генетические варианты трансферрина (Приложение 5, пример 7) в большинстве случаев не препятствуют точной количественной оценке CDT. Тем не менее, сведения о наличии у обследуемого генетического варианта должны быть отражены в Протоколе исследования, а в случае получения положительных результатов, близких к пороговым, рекомендуется повторить анализ через 3-4 недели на образцах свежей сыворотки и подробнее изучить клинические данные пациента.

4. Факторы, ассоциированные с наличием блока ди-трисиалотрансферрина.

В литературных источниках описаны редкие случаи неполного разделения фракций ди- и трисиалотрансферрина, известные также как феномен ди-трисиало-блока (Приложение 5, пример 8). Механизм формирования блока ди-трисиалотрансферрина до конца не изучен, однако большинство авторов указывают на его взаимосвязь с органическими поражениями печени алкогольной и неалкогольной этиологии, в т.ч. алкоголь-индуцированный цирроз. Вследствие неполного разделения фракций ди- и трисиалотрансферрина корректная количественная оценка CDT невозможна. Наличие интерференции данного типа должно быть отражено в заключении о результатах исследования (Приложение 6), а пациенту назначено повторное исследование спустя 3-4 недели.

 

Возможные ошибки при интерпретации результатов тестирования

В редких случаях положительный результат тестирования может быть вызван иными причинами, нежели хроническое злоупотребление алкоголем.

Основными ошибками интерпретации результатов является неполный сбор информации, касающийся факторов способных вызывать неспецифическое повышение уровня CDT (Приложение 7).

В настоящее время установлены следующие факторы, способные стать причиной завышения значений при оценке CDT:

- CDG синдром – редкое наследственное нарушение гликозилирования гликопротеинов;

- Первичный билиарный цирроз;

- Активный хронический гепатит*;

- Клеточная карцинома печени.

Интерпретация результатов у пациентов с указанными состояниями может быть затруднительной и требует дополнительных подтверждающих анализов. Тем не менее, следует отметить, что рекомендованный в качестве материально-технической базы метод капиллярного электрофореза Sebia позволяет выявлять профили тяжелых хронических поражений печени (цирроз, карцинома, активный хронический гепатит), при которых CDT тестирование и корректная интерпретация полученных данных невозможны, что позволяет избежать выдачи ложных результатов (Приложение 5, пример 8).

*Примечание: Активный хронический гепатит может приводить к обратному эффекту – занижению значений CDT вследствие формирования на ЭФ профиле блока «2-3- сиало».

 

 

Оформление заключения о результатах исследования

После завершения анализа и интерпретации результатов формируется заключение о результатах исследования с включением в него данных качественной и количественной оценки CDT (Приложение 6). Заключение должно быть подписано врачом-лаборантом или фельдшером, проводившим анализ.