Глава 2 материалы и методы

Клиническим материалом служила венозная кровь, взятая из локтевой вены пациентов исследуемой и контрольной групп. В исследование было включено 31 человек. Пациенты исследуемой контрольной группы в возрасте 20-55 лет: женщины (9) и мужчины (1), n=10, с индексом массы тела (ИМТ) 18,5<ИМТ<25. Пациенты 2  группы аналогичного возраста, в анамнезе ХРК и ожирение: женщины (4) и мужчины (3), n=7, ИМТ>27. Пациенты 3 группы 20-55 лет с ХРК: женщины (11) и мужчины (3) 18,5<ИМТ<25. Критерием отбора в контрольную группу служило отсутствие в анамнезе ХРК и ожирения.

Пациенты подписывали информированные согласия для исследований, заполняли специальные анкеты, проходили взвешивание, измерение роста, получали клиническую консультацию врача иммунолога-аллерголога.

Анализ биохимических показателей

Определение концентрации общего билирубина в сыворотке крови

Концентрацию билирубина определяем при помощи набора Вектор-Бест (Новосибирск) Билирубин–Ново.

Принцип метода:

Прямой (связанный, конъюгированный с глюкуроновой кислотой) билирубин непосредственно реагирует с диазотированной сульфаниловой кислотой, а общий билирубин – в присутствии кофеинового реагента с образованием окрашенного азосоединения. Интенсивность окраски

реакционной среды пропорциональна концентрации билирубина и измеряется фотометрически при длине волны 535нм.

Нормальные величины: 8,5-20,5 мкмоль/л

Проведение анализа:

Измерение происходит при длине волны 535 нм, температуре 37 градусов, длине оптического пути 10 мм.

Установить пробу на борт анализатора Accеnt 200 (Польша), удостовериться, что хватает реагентов, если нет, то долить реагенты до нужного числа проб.

Затем задать программу, т.е. ввести какие показатели нужно измерить, в нашем случае билирубин, нажать запуск.

В основе расчета содержания лежит формула

С=Е/Ек* 85,5, где

Е – Оптическая плотность опытной пробы

Ек – Оптическая плотность калибровочной пробы

85,5 – концентрация билирубина в калибраторе мкмоль/л