1) Секреторная функция: продуцируются лизоцим, активные формы кислорода (су пероксидный анион, пероксид водорода, синглетный кислород, свободный гидроксил), интерфероны, компоненты комплемента, пропердин — одно из бактерицидных веществ, ин- терлейкин-I, простагландины и многие белки-регуляторы.
2) Фагоцитоз. Он осуществляется как и у нейтрофилов за счет ферментов лизосом и активных радикалов кислорода. Различают два вида фагоцитоза моноцитов и макрофагов:
А) без участия антител и комплемента, б) с обязательным участием антител и комплемен та — с механизмом облегчения, или опсонизации. Когда в организме возникает очаг воспа ления, то в нем появляются факторы, повышающие моноцитопоэз и миграцию моноцитов в этот очаг воспаления. Здесь в очаге пришедший моноцит дифференцируется в макрофаг, активируется антителами и комплементом и осуществляет фагоцитоз.
3) Цитотоксическая функция — повреждение клеток-мишеней, в роли которых вы ступают опухолевые клетки, поврежденные и состарившиеся эритроциты. Благодаря этой функции макрофаги осуществляют противоопухолевый, противопаразитарный, противоми- кробный и противовирусный иммунитет. Цитотоксический эффект может осуществляться при непосредственном контакте макрофага с чужеродной клеткой или на расстоянии: в том и другом случае механизм цитолиза состоит в повреждении мембраны чужеродной клет ки продуктами активации кислорода, что вызывает вход в клетку осмотически активных ионов — натрия, калия, осмотический шок и разрыв мембраны клетки.
К сожалению, иногда макрофаги атакуют «невинные» клетки — клетки здорового организма, в результате чего возникает нежелательная реакция гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ).
4) Участие в процессах резорбции тканей, например, в процессах инволюции желто го тела яичников, послеродовой матки, молочных желез после лактации.
5) Стимуляция пролиферативных процессов, в частности пролиферации гладкомышечных клеток в сосудах.
6) Продукция факторов, усиливающих гемокоагуляцию — тромбоксанов, тромбопластинов, продукция факторов, усиливающих фибринолиз — активатора плазминогена.
7) Участие врегуляции углеводного (за счет поглощения инсулина) нлипидного (за хват липопротеинов низкой плотности, несущих холестерин к тканям) обменов.
8) Участие в механизмах специфического иммунитета — в процессах кооперации Т- и В-лимфоцитов. Эта функция, установленная сравнительно недавно, заключается в еле дующем: макрофаг захватывает, расщепляет и перерабатывает антиген и представляет ан- тигеновую информацию Т- и В-лимфоцитам. Этот процесс носит название презентации ан тигена. Кроме того, макрофаги вырабатывают монокины, которые могут усиливать или, наоборот, тормозить иммунный ответ со стороны Т- и В-лимфоцитов (интерлейкины-1).
Таким образом, макрофаги выполняют не только роль клеточного неспецифического иммунитета, но и участвуют в реализации специфического иммунитета.
СПЕЦИФИЧЕСКИЙ ИММУНИТЕТ. ЛИМФОЦИТЫ
Органы иммунной системы. Под иммунной системой в узком значении слова обычно - понимаются механизмы защиты от чужеродного в генетическом отношении вещества, которые реализуются с участием лимфоцитов.
Лимфоциты развиваются из стволовой кроветворной клетки, которая под влиянием интерлейкина-1 дифференцируется в КОЕВ, из которой развиваются последовательно пролимфобласт В, пролимфоцит В, лимфоцит В, из которого развиваются плазмоциты (через стации плазмобласт -> проплазмоцит -> плазмоцит). Под влиянием интерлейкина-11 СКК дифференцируется в КОЕ,-, из которой последовательно развиваются пролимфобласт Т, пролимфоцит Т и лимфоцит Т (все его популяции — хелперы, супрессоры, киллеры, клетки памяти).
В отличие от других форменных элементов крови, созревание лимфоцитов не ограничивается костным мозгом — здесь лишь возникают родоначальники популяций, а основные этапы развития идут в других областях. В частности, предшественники Т-лимфоцитов вначале попадают в тимус (поэтому и название Т-лимфоциты, или тимусзависимые), а затем они зреют в лимфатических узлах, пейеровых бляшках, селезенке. В-лимфоциты, возможно, прежде чем попасть в селезенку, также проходят стадию созревания вне костного мозга (у птиц это происходит в фабрициевой сумке — бурсе, поэтому и название — бурсазависи- мые лимфоциты, В-лимфоциты). Костный мозг и вилочковую железу принято называть первичными лимфатическими органами, или цетральными органами, а селезенку, лимфатические узлы, пейеровые бляшки, аппендикс, миндалины — вторичными, или периферическими лимфатическими органами. Во вторичных органах происходит пролиферация лимфоцитов в ответ на антигенную стимуляцию (на конкретный антиген).
В итоге, в периферической крови количество лимфоцитов в норме составляет 18—40% от общего числа лейкоцитов, а внутри этой группы доля Т-лимфоцитов составляет 40— 70%, В-лимфоцитов — 20—30%, 0-лимфоцитов — 10—20%.
Принято все виды лимфоцитов разделять в зависимости от выполняемой ими функции:
1) клетки, узнающие чужеродный антиген и дающие сигнал началу иммунного ответа. Такие клетки получили название антигенреактивные клетки, или клетки иммунологичес кой памяти;
2) клетки-эффекторы, непосредственно выполняющие процесс элиминации чужеродно го в генетическом отношении материала. Это цитотоксические клетки, или клетки-килле ры (убийцы), или клетки-эффекторы ГЗТ;
3) клетки, помогающие образованию эффекторов, их называют хелперы (от англ. слова help — помогать);
4) клетки, тормозящие начало и осуществляющие прерывание, окончание иммунной реакции организма, их называют супрессоры;
В-клетки, вырабатывающие иммуноглобулины.
Всего у человека 1012 лимфоцитов или 106 клонов. Число же возможных антигенов — около 10". Это означает, что часть лимфоцитов «свободна» и готова к встрече с неизвестными ещё антигенами.
Суть теории иммуногенеза, которая на сегодня является наиболее признанной, сводится к следующим положениям:,
В эмбриональном периоде закладывается столько лимфоцитов (или даже больше), сколько есть в среде антигенов. Каждый лимфоцит содержит антитела против предполагае мого антигена. Эти антитела продуцируются лимфоцитом в небольших количествах, и ло кализуются они на поверхности лимфоцита, выполняя роль рецептора антигена.
Когда в организме появляется антиген, то он взаимодействует только с одним видом лимфоцитов, который соответствует ему по рецепторам-антителам. В результате начина ется пролиферация этого вида лимфоцитов (популяция), клонирование отдельных видов лимфоцитов, наработка ими соответствующих количеств антител (отшнуровка рецепторов) и последующая элиминация антигена либо путем связывания его, либо за счет цйтотоксиче- ского повреждения клетки-антигена.
Лимфоциты, имеющие рецепторы к собственным (нечужеродным) антигенам и быв шие в контакте с этими антигенами в эмбриональном периоде, не способны к пролифера ции, так как это им запрещено соответствующими Т-супрессорами. Не исключено, что этот
189 запрет осуществляется за счет выработки Т-супрессорными клетками антител к собственным антигенам, которые и блокируют рецепторы на обычных лимфоцитах.
Фазы иммунного ответа. Различают три фазы иммунного ответа: 1) афферентная фаза — распознавание антигена и активация иммунокомпетентных клеток;
2) центральная фаза — вовлечение в процесс клеток-предшественниц, пролиферация, дифференциация, в том числе в клетки памяти и клетки-эффекторы;
3) эффекторная фаза — разрушение, элиминация антигена из организма либо гумо ральным путем за счет реакции антитело + антиген, либо клеточным — цитотоксическая реакция.
Антигены. Это одно из основных понятий в иммунологии. К антигенам относятся: белки, полисахариды, липополисахариды, нуклеиновые кислоты как в очищенном виде, так и в виде структурных компонентов различных биологических структур (клеток, тканей, вирусов). Обычно это молекулы с большой массой. На поверхности молекулы сложного антигена имеются функциональные группы, которые определяют особенность и специфичность данного вещества. Они получили название антигенных детерминант. Число детерминант на поверхности молекулы определяет валентность антигена.
Для иммунного ответа обычно нужно несколько молекул антигена, сконцентрированных в виде обоймы. Такую концентрацию антигенов, циркулирующих в крови или находящихся в тканях, осуществляет Т-лимфоциты-хелперы и макрофаг. Макрофаг за счет наличия иммуноглобулиновых рецепторов захватывает антиген, 90% его переваривается, а 10% идет на поверхность макрофага — происходит процессинг, концентрация антигенных детерминант. В результате такой работы слабый антиген повышает свою антигенность в 1000 раз, а сильный — увеличивает ее в 10 раз. Затем эта информация представляется Т-лимфоцитам-хелперам, которые в последующем передают ее на В-лимфоциты или на Т-киллеры.
Для представления антигена В-лимфоциту необходимо двойное распознавание, смысл которого сводится к следующему: В-лимфоцит узнает детерминанту антигена. Одновременно Т-хелпер с помощью своих рецепторов опознает макрофаг, который представляет антиген, и сам антиген, находящийся на макрофаге. Распознав «чужое», Т-хелпер продуцирует интерлейкин-П, который вызывает превращение В-лимфоцита в плазматическую клетку — непосредственный производитель антител против узнанного антигена. Макрофаг в ответ на данное взаимодействие начинает продуцировать интерлейкин-1, который активирует наработку В-лимфоцитов из стволовой кроветворной клетки.
Такое взаимодействие макрофага, Т-хслперов и В-лимфоцитов получило название процесса кооперации. Ему уделяется большое внимание в иммунологии, так как нарушение этого процесса приводит к блокаде выработки антител.
Судьба антигенов. Существуют различные способы «нейтрализации», или элиминации антигена. В процессе эволюции были отобраны наиболее надежные и адекватные для каждого антигена способы. Можно выделить как минимум шесть таких способов.
1. Нейтрализция, или детоксикация антигена, за счет связывания его антителом.
2. Опсонизация — связывание антигена антителом, образование единого комплекса, который захватывается макрофагом и в последующем фагоцитируется им.
3. Контактный лизис, или цитотоксичность — этот способ ценен в отношении чужерод ных клеток.
4. Реакция связывания комплемента, или комплемент-зависимый цитолиз, когда клетка- антиген уничтожается путем цитотоксического эффекта, но предварительно на клетку-ан тиген «садится» комплемент, облегчающий киллинг.
5. Воспалительная реакция: вокруг чужеродного антигена-клетки собираются фагоциты и пожирают его.
6. Элиминация циркулирующих комплексов «антиген-антитело» через почки, кишеч ник, печень.
Рассмотрим более подробно функцию В-лимфоцитов и плазмоцитов, продуцирующих антитела. Как уже отмечалось выше, популяция В-лимфоцитов неоднородна с точки зрения выполнения ими функций. Различают антител-продуценты, или плазматические клетки, киллеры, или цитотоксические клетки, супрессоры и клетки иммунологической памяти.
Все В-лимфоциты содержат на своей проверхности специфические рецепторы. Это антитела, которые с момента развития В-лимфоцита он продуцирует г- специфические иммуноглобулины, узнающие только один антиген (один рецептор, или один иммуноглобулин — один антиген). В каждом лимфоците на его плазматической мембране таких однородных рецепторов примерно 10*—105, благодаря чему один В-лимфоцит способен связывать до ISO тыс. молекул антигена. После узнавания начинается процесс пролиферации и дифференцировки В-лимфоцитов и усиление продукции антител — тех же самых иммуноглобулинов, которые выступали в роли рецепторов.
Кроме специфических рецепторов, каждый В-лимфоцит на своей поверхностной мембране имеет и неспецифические рецепторы, в том числе для связывания комплемента, а точнее его Сз -компонента, рецепторы для Фс-фрагментов любых иммуноглобулинов.
Антитела. Они выполняют в организме две основные функции. Первая — распознавание и специфическое связывание соответствующих антигенов, вторая — эффекторная: антитело индуцирует физиологические процессы, направленные на уничтожение антигена, — лизис чужеродных клеток через активацию системы комплемента, стимуляцию специализированных иммунокомпетентных клеток, выделение физиологически активных веществ и т.п. По своей химической природе все антитела относятся к гликопротеидам. Белки, составляющие основу антител, относятся к глобулинам. В составе антитела имеются константные области и вариабельные. Вариабельная область имеет абсолютную специфичность, благодаря которой антитело способно узнать соответствующий антиген.
Все антитела можно разделись на пять больших классов — IgG, IgM, IgA, IgD, IgE.
Иммуноглобулины IgG содержатся в сыворотке, имеют два участка для связывания антигена, преципитируют (осаждают) растворимые в воде антигены, вызывают агглютинацию (склеивание) корпускулярных антигенов, вызывают их лизис, но при условии, что на антигене будет комплемент. В силу особенностей строения IgG способны проходить через плаценту. Благодаря этому плод во время беременности получает от матери антитела против ряда возбудителей инфекционных болезней.
Все остальные виды иммуноглобулинов не способны в норме проходить через плацентарный барьер..
Иммуноглобулины IgM содержатся в сыворотке и лимфе. Они способны преципитиро- вать, агглютинировать и лизировать антигены. Этот класс иммуноглобулинов обладает наибольшей способностью к связыванию комплемента.
Иммуноглобулины IgA обнаружены в сыворотке и слизистых оболочках. Они не могут преципитировать, агглютинировать и лизировать корпускулярные антигены. Под их влиянием активируется комплемент, в результате чего происходит опсонизация бактерий, что облегчает их захват фагоцитами (нейтрофилами и макрофагами).
Иммуноглобулины IgD находятся в сыворотке, они не способны связывать комплемент. ' Роль их до настоящего времени не ясна.
Иммуноглобулины IgE выявляются в сыворотке, не связывают комплемент, очевидно, участвуют в аллергических реакциях, так как при этих состояниях их концентрация в крови существенно возрастает.
Динамика накопления антител. При первичной встрече антигена с В-лимфоцитами спустя несколько дней (около 10) происходит повышение уровня иммуноглобулинов IgM, которые специфически связывают введенный антиген. В последующем синтез этого вида антител снижается и на смену ему приходит синтез специфических антител, принадлежащих к иммуноглобулину IgG. После завершения инвазии данного микроба концентрация антител к нему снижается. При вторичном поступлении, например, через год, возникает, так называемый, вторичный ответ: буквально через сутки начинается быстрый синтез антител к этому антигену, которые принадлежат к классу IgG. Такой быстрый и окончательный ответ обусловлен существованием клеток-памяти, которые сохраняли информацию о данном антигене в течение всего этого года.
191
Механизм действия антител. Антитела распознают антиген и связываются с ним. Если антиген — это корпускулярная частица (клетка), то антитело совместно с комплементом образует отверстие в мембране клетки-мишени, в результате чего открывается доступ внутрь клетки ферментов сыворотки или лизосомальных ферментов, и это в конечном итоге приводит к гибели клетки. Если антиген является растворимым, то под влиянием антитела он осаждается, становится нерастворимым. Для корпускулярных частиц существует еще один способ их элиминации — в результате присоединения антител антигены склеиваются между собой (агглютинируют) и выпадают в осадок.
Клеточный иммунитет. Физиология Т-лимфоцитов. Выше уже отмечалось, что популяция Т-лимфоцитов неоднородна; имеются клетки-киллеры, или убийцы; Т-хелперы, или помощники; Т-супрессоры, или ингибиторы иммунных реакций; Т-памяти.
Кроме такого деления выделяют антигенреактивные Т-лимфоциты. Они имеют рецепторы к антигену для его распознавания. При распознавании «своего» антигена Т-лимфоцит превращается в иммунобласт и начинает продуцировать медиатор, благодаря которому активируется ход последующих иммунных реакций, в том числе активация и размножение Т-хелперов. После окончания реакции бласт вновь превращается в малый лимфоцит- Механизмы Т-клеточного иммунитета разнообразны: отторжение трасплантата, реакция трансплантата против хозяина, реакция против некоторых бактерий, вирусов, грибов, реакция противоопухолевого иммунитета. В основе всех этих реакций лежит цитотоксический эффект Т-лимфоцитов, а точнее — Т-киллеров. После того, как Т-киллер получает информацию о наличии чужеродного антигена, он совершает цитотоксическое действие (цитолиз), например цитолиз клетки-трансплантата или клетки-опухоли. Цитолиз может проходить при непосредственном контакте Т-киллера с клеткой-мишенью, либо опосредованно — через среду. В обоих случаях Т-лимфоцит совершает «укол» клетки: выпускает из своей цитоплазмы либо продукты активации кислорода (супероксидный ион), пероксид водорода, либо лимфотоксин, либо специфические гранулы. Все эти «стрелы» нарушают целостность мембраны клетки-мишени, что приводит к осмотическому шоку этой клетки и гибели. Такие удары по клеткам-мишеням один и тот же Т-киллер может совершать неоднократно. Существует еще один вариант цитотоксического действия Т-киллера: выделение лимфокинов, благодаря которым макрофаги повышают свою чувствительность к конкретной клетке-мишени и фагоцитируют ее.
Все Т-лимфоциты содержат на своей поверхности специфические и неспецифические рецепторы. Специфические рецепторы — это особый вид иммуноглобулинов (IgT), которые состоят только из тяжелых цепей. Они предназначены для связывания с антигенами. На одном Т-лимфоците примерно 100—200 таких рецепторов, благодаря чему один Т-лимфоцит способен связать до 500—3000 молекул антигена. У хелперов, киллеров, супрессоров свои специфические рецепторы. Неспецифические рецепторы призваны связывать любые иммуноглобулины, а также различные гуморальные факторы, активирующие или тормозящие ответ Т-лимфоцита на антиген.
Т-хелперы предназначены для активации В-лимфоцитов или Т-лимфоцитов. Механизм активации реализуется либо за счет прямого контакта Т-хелпера с активируемым лимфоцитом, либо опосредованно, за счет продукции так называемых хелперных факторов.
Т-супрессоры регулируют направление и объем иммунологической реакции путем ограничения пролиферации клонов лимфоцитов, путем угнетения образования антител В-лим- фоцитами, путем угнетения дифференцировки киллеров. Второй важный аспект деятельности Т-супрессоров — это обеспечение иммунологической толерантности к определенным антигенам, в том числе к «своим» антигенам.
Иммунологический надзор. Постоянно в организме погибают, стареют и повреждаются различные клетки, в том числе — эритроциты, миоциты, нервные клетки. Непрерывно в организме образуются опухолевые клетки, т. е. клетки, утратившие контроль за развитием и стремящиеся к безудержному размножению. Все эти клетки становятся чужеродными в генетическом отношении. Поэтому необходим постоянный иммунный надзор за «домаш-
ним хозяйством». Механизм, обеспечивающий иммунный надзор, осуществляется за счет трех видов реакций, в основе которых лежит процесс узнавания «чужого», цитолиз и элиминация. Все эти процессы возникают под влиянием специфических гуморальных факторов, выделяемых участниками этих реакций. Итак, три вида реакций.