Выделение фекокультуры (уринокультуры. Холекультуры)

ПРИНЦИПЫ КЛАССИФИКАЦИИ САЛЬМОННЕЛЛ.

В медицинской микробиологии используется классификация сальмонелл по анти­генным свойствам (схема Кауфмана и Уайта).

 

СОКРАЩЕНАЯ СХЕМА КАУФМАНА И УАЙТА

Серовар	Соматический (О) антиген	Жгутиковый	(Н) антиген
		1-я фаза	2-я фаза
Группа А
S.paratyphi A	1,2,12	а	1,5
S.kiel	1,2,12	g, p	-
Группа В
S.paratyphi В	1,4,(5),12	b	1,2
S.abortusbovis	1,4,12,27	b	е,n,х
S.typhimunum	1,4,(5),12	i	1,2
Группа С
S.paratyphi С	6,7,vi	с	1,5
S.newport	6,8	e,h	1,2
Группа Д
S.sendai	1,9,12	а	1,5
S.typhi	9,12,vi	d	-
S.enteritidis	1,9,12	g,m	(1., 7)
Группа Е
S.oxford	3,10	а	1,7
S.zanzibar	3,10	k	1.5

Обведите в схеме Кауфмана-Уайта красным карандашом группоспецифические анти­гены.

 

Выпишите групповые антигены для сальмонелл первых 5 серогрупп:

А - 1,2,12; В - 1,4,12; С - 6; Д - 9,12; Е – 3,10.

 

Предложите необходимую последовательность операций для получения монорецепторной адсорбированной сыворотки О-9:

1 гипериммунизация животного

2 забор крови

3 пригатовление поливалентной сыворотки

4 адсорбция АГпри по-изм близких серогрун

5 бактерии

Этиология:

брюшной тиф – s.typi

паратиф А – s. paratypi A

паратиф В – s. Paratypi B

Источник инфекции - больные люди и носители

Механизм передачи – фекально-оральный

Ведущие звенья патогенеза – попадает в рот полости-тонкая кишка-размножаются-в кровь-в селезенку-печень,почки, кости,мозг

 

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА БРЮШНОГО ТИФА И ПАРАТИФОВ.

/. Бактериологический метод. 

Выбор исследуемого материала в зависимости от этапа заболевания

 

Срок от начала заболевания   .	Период заболевания	Исследуемый материал
0-1 неделя   1-2 неделя	Инкубационный период     Период разгара болезни	Кровь   Испражнение мочи желчь

 

ВЫДЕЛЕНИЕ ГЕМОКУЛЬТУРЫ

I этап.

Посев крови на среду Рапопорт в соотношении 1/10.

Состав среды Рапопорт: МПБ + глюкоза + желчь + индикатор рН.   Во флаконы со средой помещается поплавок.

 

II этап.

1. Учет роста на среде Рапопорт.

S.typhi                  S.paratyphi A / S.paratyphi В

 

2. Высев со среды Рапопорт на трехсахарный агар и среду Эндо.

Высев на трехсахарный агар проводится для сокращения сроков исследоваия, так как мы предполагаем, что на среде Рапопорт уже имеем дело с чистой культурой. Высев на среду Эндо проводится для контроля чистоты выделенной культуры.

 

III этап.

1. Контроль чистоты выделенной культуры по среде Эндо.

Вывод: получена чиста культура микроорганизма

 

Если на среде Рапопорт росла чистая культура - проводится учет биохимических свойств по трехсахарному агару. Если культура смешанная - проводят откол лактозонегативых колоний со среды Эндо на трехсахарный агар.

 

2. Учет биохимических свойств по трехсахарному агару.

Результат: глюкоза - ________ + ________________

лактоза и сахароза - _______-_________

сероводород - ___________+___________

Вывод: выделенная группа  (культура) относится к ряду salmonella

 

3. Серотипирование выделенной культуры.

 

Название реакции PA

Исследуемый материал культура микроорганизмов

Диагностический препарат диагностические сыворотки

Результат реакции:

Сыворотка	ABCDE	Редких групп	0-2	0-4	0-9	H-d	H-g
Результат	+	-	-	-	+	+	-

Вывод: обнаруженная группа серовар  s.typhi        

4. Определение спектра антибиотикорезистентности и внутривидовое типирование.

IV этап.

Учет результатов:

а)  Определение антибиотикорезистентности.

 

Название реакции метод стандартных дисков

Исследуемый материал культура микроорганизмов

Диагностический препарат диски с АБ

Результат

Название антибиотика	Диаметр зоны задержки роста, мм	У, УУ, Ч
Левалецитин	22	ч
Ампицилин	24	ч
Тетрациклин	23	ч

 

Вывод: выделенная группа чувствительная клевацитину тетрациклину и ампицилину

б) Фаготипирование.

 

Название реакции фаготипирование

Исследуемый материал культура микроорганизмов

Диагностический препарат типовые фаги

Вывод: s.typhi фаготип 10

Заключение: выделенная культура относится к роду salmonella серовар s.typhi,фаготип 10,чувствителен к лецитину,тетрациклину,ампецилину  

 

 

ВЫДЕЛЕНИЕ ФЕКОКУЛЬТУРЫ (уринокультуры. холекультуры).

1 день.	Посев испражнений на:
	среду Плоскирева, среду Эндо	селенитовый бульон.
2 день.	Откол лактозонегативных колоний на трехсахарный агар.	Высев на среду Плоскирева, Висмут- сульфит.агар
3 день.	Учет биохимических свойств	Пересев калоний на скошенный агар для получения чистой культуры
4 день.	Серотипирование	Серотипирование
5 день.	Определене антиобиорезистентности и фаготипирования	Определение антибиотикорезистенстности и фаготерпирования

//. Серодиагностика брюшного тифа в РНГА.

 

Название реакции РНГА

Исследуемый материал сыворотка крови

Диагностический препарат диагностикум

Результат реакции:

Вариант «А»

Эритроцитарные диагностикумы	Разведения сыворотки больного
	1/50	1/100	1/200	1/400	1/800	К д	К с
ABCDE	+	+	+	+	-	-	-
О-2	-	-	-	-	-	-	-
О-9	+	+	+	+	-	-	-
Н-а	-	-	-	-	-	-	-
H-g	-	-	-	-	-	-	-

Диагностический титр - 1/200.

Вывод: (установить диагноз и стадию заболевания) выявленный серотип 0-9 брюшной тиф,т.к. титр сыворотки падает,что говорит о выздоровлении

Вариант «В»

Эритроцитарные диагностикумы	Разведения сыворотки больного
	1/50	1/100	1/200	1/400	1/800	К д	К с
ABCDE	+	+	+	+	-	-	-
О-2	+	+	+	+	-	-	-
О-9					-	-	-
Н-а	-	-	-	-	-	-	-
H-g	-	-	-	-	-	-	-

Диагностический титр - 1/200.

Вывод: (установить диагноз и стадию заболевания )паратиф А    

Вариант «С»

Эритроцитарные диагностикумы	Разведения сыворотки больного
	1/50	1/100	1/200	1/400	1/800	К д	К с
ABCDE	+	+	+	+	-	-	-
O-2	-	-	-	-	-	-	-
О-9	-	-	-	-	-	-	-
Н-а	+	+	+	+	-	-	-
H-g	-	-	-	-	-	-	-

Диагностический титр - 1/200.

Вывод: (установить диагноз и стадию заболевания) паратиф В