Методы «сухой химии» при проведении общего анализа мочи

В современной лабораторной диагностике уже в течение многих лет применяются так называемые технологии «сухой химии», при которой для анализа все необходимые компоненты (реагенты) наносятся в фабричных условиях на носитель - бумажную или пластиковую основу.

Производимые в настоящее время различными зарубежными и отечественными фирмами-производителями тест-полоски позволяют в течение нескольких минут осуществить полуколичественную оценку исследуемого образца мочи. Приборы, работающие на принципе отражательной фотометрии, позволяют использовать тест-полоски не только для полуколичественной, но и количественной оценки результата [9].

Основным достоинством данного способа является быстрота и простота определения.

Тест-полоски поставляются в герметичном контейнере-пенале, на котором наклеена этикетка, содержащая соответствующее количество цветовых шкал. Они состоят из цветовых полей, рядом с которыми указана соответствующая концентрация исследуемого компонента.

При визуальной оценке проводят сравнение реакционной зоны тест-полоски с прилагаемой цветовой шкалой через 60 секунд после начала реакции (смачивания тест-полоски мочой). Пример цветовой шкалы представлен на рисунке 1.

Рисунок 1

Полуколичественным результатом анализа является не конкретное число (с определенной погрешностью), а интервал значений, в котором находится измеряемая величина. В ряде тест-полосок ответ приводят в баллах (балльная оценка). В этом случае констатируют факт обнаружения белка в образце или его отсутствие по системе «+»: отрицательно, +, ++, +++, ++++. В других тест-системах приводят полуколичественные результаты в г/л (см. рисунок 1) [12].

У тест-полосок разных производителей значения концентрации на цветовых шкалах могут отличаться, в связи с этим необходимо пользоваться только цветовой шкалой, поставляемой вместе с тест-полосками.

При работе с диагностическими тест-полосками необходимо придерживаться следующего алгоритма действий.

1) Перемешать мочу с помощью стеклянной палочки.

2) Отобрать в пробирку необходимое количество мочи (чтобы погрузить часть тест-полоски с нанесенными сенсорными зонами).

3) Открыть пенал, достать тест-полоску (сразу закрыть, крышку не класть внутренней стороной на стол). Не захватывать пальцами сенсорные зоны.

4) Погрузить тест-полоску на 2-3 секунды в мочу (точное время см. в инструкции предварительно).

5) Извлечь тест-полоску, удалить избыток влаги (провести ее ребрами по краю контейнера или иной емкости, в которой доставлена моча, либо осторожным прикосновением ребра полоски к сухой чистой фильтровальной бумаге на 2-3 секунды).

6) Через необходимый промежуток времени (см. конкретную инструкцию) сравнить окраску сенсорных зон с цветовой шкалой на этикетке.

Алгоритм определения концентрации белка в моче с помощью тест-полосок в виде рисунков представлен в приложении А.

При потоковых анализах в КДЛ используют автоматизированный подход в работе с тест-полосками. Тест-полоску помещают в приемное устройство анализатора. Результаты рассчитывает микропроцессор по соответствующим алгоритмам, ответ представляется в виде распечатанного бланка. В основе работы данных анализатор лежит метод отражательной фотометрии [9].

Применяемые в современных лабораториях анализаторы мочи на основе отражательных фотометров бывают двух типов. В первом типе приборов реализован метод оценки изменения цвета тестовых зон, аналогичный цветовому восприятию глаза человека. Тестовые зоны освещаются белым светом, содержащим все длины волн видимого диапазона спектра. Изменение окраски тестовой зоны в результате реакции с аналитами осуществляется сопоставлением сигналов от трех типов селективных фотоприемников в трех диапазонах длин волн: красном, зеленом и синем (рисунок 2). Точно так же устроено и цветовое зрение человека.  

Рисунок 2

На этом принципе основана работа подавляющего большинства анализаторов мочи, в том числе и таких широко известных в нашей стране приборов, как URiSCAN-Optima, URiSCAN-Pro (производство YD Diagnostics, Ю. Корея), URiСКАН-про (производство ООО «Эйлитон», Россия).

Во втором типе анализаторов применяется метод измерения коэффициента отражения тестовых зон на определенных длинах волн. Для каждой тестовой зоны подбирается оптимальная длина волны света, на которой изменение коэффициента отражения имеет наиболее выраженный характер зависимости от концентрации аналита в моче. В таких анализаторах тестовые зоны освещаются с помощью светодиодов, имеющих узкий спектр излучения, а отраженный сигнал регистрируется неселективным фотоприемником (рисунок 3) [5].

Рисунок 3

Данный принцип реализован, например, в анализаторе мочи URiСКАН-strip (ООО «Эйлитон», Россия) – рисунок 4.

Рисунок 4

Результаты, полученные с помощью экспресс-анализаторов мочи, приближаются к разряду количественных и могут быть представлены в виде распечатанного бланка результатов (рисунок 4).