ОПЫТ №2:Восстановление индигокармина

Впробирку наливают 2 мл 5%-ного раствора глюкозы, прибав­ляют 2 мл 10%-ного раствора карбоната натрия и раствор индиго-кармина до получения темно-синей окраски. При осторожном нагревании полученного раствора происходит восстановление лндигокармина и жидкость приобретает желтоватую окраску. Если синяя окраска долго не исчезает, то необходимо добавить немно­го раствора глюкозы. Раствор лейкосоединения охлаждают и силь­но встряхивают. Снова появляется синяя окраска вследствие окис­ления лейкосоединения кислородом воздуха. При повторном нагревании синяя окраска исчезает, и раствор снова приобретает желтый цвет. В этих превращениях глюкоза выступает в роли восстановителя, окисляясь до глюконовой кислоты. Подобные пре­вращения индигокармина в лейкосоединение возможны до пол­ного исчерпания глюкозы.

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВЕЩЕСТВ - МАРКЕРОВ

НЕКОТОРЫХ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ

В ОРГАНИЗМЕ.

Обнаружение ацетона.

Ацетон — один из промежуточных продуктов обмена веществ, не содержащийся в существенных количествах в организме. Одна­ко при некоторых обстоятельствах в крови накапливаются так на­зываемые кетоновые тела, к которым, помимо ацетона, относят­ся ацетоуксусная и р-оксимасляная кислоты. Причиной накопления кетоновых тел является избыточный метаболизм липидов при не­достаточном метаболизме углеводов. Любая причина, приводящая к понижению доступности углеводов, будет усиливать утилиза­цию жирных кислот. При углеводном голодании запасы гликогена быстро истощаются, и выживание зависит от энергии, получае­мой при распаде липидов, что и приводит к накоплению кетоно­вых тел в крови, почках и моче. При значительном накоплении ацетона в организме он может быть обнаружен в выдыхаемом воз­духе. Это состояние называют кетозом. Причины кетоза самые раз­нообразные: ограничения в питании, диеты, желудочно-кишеч­ные заболевания, сахарный диабет, интенсивная мышечная нагрузка.

В медицинской практике накапливающийся в организме аце­тон обнаруживают при помощи проб Легаля и Либена.

Опыт №1Проба Легаля

В пробирку помещают 1 каплю свежеприготовленного 0,25М раствора нитропруссида натрия, 5 капель воды и 1—2 капли ис­следуемой жидкости, содержащей ацетон. При добавлении 1 капли 2М раствора гидроксида натрия появляется темно-красное окра­шивание, переходящее в оранжевое, которое при подкислений 1 каплей 2М раствора уксусной кислоты усиливается и стано­вится вишнево-красным.

Опыт №2. Проба Либена

В пробирку помещают 1 каплю раствора иода в иодиде калия и 5 капель 2М раствора гидроксида натрия. К обесцвеченному раствору добавляют 1—2 капли исследуемой жидкости. В случае присутствия ацетона немедленно без нагревания выпадает желто-белый осадок с характерным запахом йодоформа:

                                                                           иодоформ        ацетат натрия

Иодоформная проба очень чувствительна и позволяет обнару­живать ацетон в растворах при содержании его около 0,04%.