Впробирку наливают 2 мл 5%-ного раствора глюкозы, прибавляют 2 мл 10%-ного раствора карбоната натрия и раствор индиго-кармина до получения темно-синей окраски. При осторожном нагревании полученного раствора происходит восстановление лндигокармина и жидкость приобретает желтоватую окраску. Если синяя окраска долго не исчезает, то необходимо добавить немного раствора глюкозы. Раствор лейкосоединения охлаждают и сильно встряхивают. Снова появляется синяя окраска вследствие окисления лейкосоединения кислородом воздуха. При повторном нагревании синяя окраска исчезает, и раствор снова приобретает желтый цвет. В этих превращениях глюкоза выступает в роли восстановителя, окисляясь до глюконовой кислоты. Подобные превращения индигокармина в лейкосоединение возможны до полного исчерпания глюкозы.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВЕЩЕСТВ - МАРКЕРОВ
НЕКОТОРЫХ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ
В ОРГАНИЗМЕ.
Обнаружение ацетона.
Ацетон — один из промежуточных продуктов обмена веществ, не содержащийся в существенных количествах в организме. Однако при некоторых обстоятельствах в крови накапливаются так называемые кетоновые тела, к которым, помимо ацетона, относятся ацетоуксусная и р-оксимасляная кислоты. Причиной накопления кетоновых тел является избыточный метаболизм липидов при недостаточном метаболизме углеводов. Любая причина, приводящая к понижению доступности углеводов, будет усиливать утилизацию жирных кислот. При углеводном голодании запасы гликогена быстро истощаются, и выживание зависит от энергии, получаемой при распаде липидов, что и приводит к накоплению кетоновых тел в крови, почках и моче. При значительном накоплении ацетона в организме он может быть обнаружен в выдыхаемом воздухе. Это состояние называют кетозом. Причины кетоза самые разнообразные: ограничения в питании, диеты, желудочно-кишечные заболевания, сахарный диабет, интенсивная мышечная нагрузка.
|
|
В медицинской практике накапливающийся в организме ацетон обнаруживают при помощи проб Легаля и Либена.
Опыт №1Проба Легаля
В пробирку помещают 1 каплю свежеприготовленного 0,25М раствора нитропруссида натрия, 5 капель воды и 1—2 капли исследуемой жидкости, содержащей ацетон. При добавлении 1 капли 2М раствора гидроксида натрия появляется темно-красное окрашивание, переходящее в оранжевое, которое при подкислений 1 каплей 2М раствора уксусной кислоты усиливается и становится вишнево-красным.
Опыт №2. Проба Либена
В пробирку помещают 1 каплю раствора иода в иодиде калия и 5 капель 2М раствора гидроксида натрия. К обесцвеченному раствору добавляют 1—2 капли исследуемой жидкости. В случае присутствия ацетона немедленно без нагревания выпадает желто-белый осадок с характерным запахом йодоформа:
|
|
иодоформ ацетат натрия
Иодоформная проба очень чувствительна и позволяет обнаруживать ацетон в растворах при содержании его около 0,04%.