Метод внутреннего стандарта

Метод внутренней нормализации

Относительные поправочные коэффициенты

В связи с невысокой точностью дозирования пробы разработан ряд методов, в которых величина пробы не используется в расчётах. В этих методах применяют относительные поправочные коэффициенты. Они учитывают различия в чувствительности используемого детектора к компонентам анализируемой пробы и мало зависят от параметров процесса. Их находят предварительно для каждого компонента пробы.

Для определения относительных поправочных (калибровочных) коэффициентов готовят серии бинарных смесей известного состава и по полученным хроматограммам проводят расчёт по формуле

k_i =(w_i /w_ст)/(S_i / S _ст), (4)

где w _i – содержание i -го компонента в калибровочной смеси, %; w_ст. – содержание компонента, выбранного в качестве стандарта, %; S_i – площадь пика i -го компонента; S _ст. – площадь пика компонента, выбранного в качестве стандарта.

Можно использовать калибровочные смеси и из большего числа веществ, однако точность определения при этом может понизиться.

Относительные поправочные коэффициенты используют в методах внутренней нормализации, внутреннего стандарта и др.

Сущность метода заключается в том, что сумму площадей пиков всех компонентов смеси принимают за 100 %.

Необходимым условием применения метода является регистрация всех компонентов (на хроматограмме присутствуют разделённые пики всех компонентов смеси).

Концентрацию i -го компонента рассчитывают по формуле

w _i = k_i ∙ S_i ∙ 100/ Σ(k_i ∙ S_i).

При расчёте поправочных коэффициентов по формуле (4) для данного метода в качестве стандарта может быть выбрано одно из соединений, входящее в состав исследуемой смеси. Калибровочный коэффициент для стандартного вещества приравнивается к 1.

Сущность метода заключается в том, что в анализируемую смесь вводят определённое количество стандартного вещества (вещества сравнения).

Содержание i -го компонента анализируемой смеси вычисляют по формуле

w _i = k_i ∙ S_i ∙ 100 ∙ r / S _ст..

где k_i – относительный поправочный коэффициент i -го компонента, рассчитанный по формуле (4); S_i и S _ст. – площади пиков i -го компонента и внутреннего стандарта; r – отношение массы внутреннего стандарта к массе анализируемой смеси (без стандарта): r = m _ст./ m _смеси.

Требования к веществу, используемому в качестве внутреннего стандарта:

§ оно не должно входить в состав исследуемой смеси;

§ оно должно быть инертным по отношению к компонентам анализируемой смеси и полностью смешиваться с ними;

§ пик стандарта должен быть хорошо разрешённым и располагаться в непосредственной близости от пиков определяемых соединений.

Внутренний стандарт выбирается из числа соединений, близких по структуре и физико-химическим свойствам к компонентам анализируемой смеси. Относительные поправочные коэффициенты компонентов смеси определяются по отношению к внутреннему стандарту.

Метод применяется как при условии регистрации на хроматограмме всех компонентов анализируемой смеси, так и в случае не полностью идентифицированных смесей. Основная трудность заключается в выборе и точной дозировке стандартного вещества.