double arrow
О-комплексных и монорецепторных О- и Н-агглютинирующих для идентификации сальмонелл в РА на стекле

Таблица 27 - Состав наборов сывороток сальмонеллезных

Таблица 26 - Антигенная структура групп сальмонелл, в которые

Таблица 25 - Дифференциация видов и подвидов бактерий рода

Таблица 24 - Биохимические свойства рода Salmonella

Признаки % позитивных реакций
Ферментация глюкозы 100%
Образование газа на среде с глюкозой 91,9%
H2S 91,6%
Индол 1,1%
Арабиноза 89,2%
Сорбит 94,1%
Дульцит 86,5%
Маннит 99,7%
Рост на среде Симмонса 80,1%

На основании биохимических характеристик возможна не только родо­вая идентификация сальмонелл, но и определение их видовой и подвидовой принадлежности.

Наибольшее значение для ветеринарии имеют сальмонеллы подвидов choleraesuis и arizonae, объединяющие более 80% всех сальмонелл.

Salmonella,первоначальные источники их выделения

Тесты Вид Подвиды вида S. choleraesuis
    S. bongori Cholerae-suis Salamae Ari-zonae Diari- zonae Houtenae Indica
b-галактозидаза (ONPG-тест) + - (-) + + - +/-
Образование кислоты из: лактозы - - - (-) (+) - (-)
дульцита - + + - - - +/-
муката + + + + +/- - +
галактоуроната + - + - + + Н.Д.
Утилизация мальтозы - - + + + - +
d-тартрата - + +/- - (-) +/- +
Гидролиз желатины - - + + + + +
Первоначальные ис­точники выделения: теплокровные живот­ные; - + - - - - Н.Д.
холоднокровные и объекты внешней сре­ды + - + + + + Н.Д.

Примечания: Данные по подвиду Indica приведены по Bergeys Manual of Determinative Bacteriology (1994). Обозначения: «-» — 0-10% штаммов положительные; «(-)» — 11-25% штаммов положительные; «+/-» — 26-75% штаммов положительные; «(+)» — 76-89% штаммов положительные; «+» — 90-100% штаммов положительные.




Учитывая возможность отклонений отдельных из перечисленных при­знаков, следует отметить, что биохимическая идентификация сальмонелл является лишь первым этапом работы в этом направлении. Окончательную идентификацию выделенных штаммов осуществляют с учетом последую­щего изучения их антигенной структуры.

Серологическая идентификация сальмонелл. Сальмонеллы имеют сложное антигенное строение. Основными антигена­ми, имеющими значение для идентификации сальмонелл на уровне рода, опре деления их видовой, серогрупповой и серовариантной принадлежности, явля­ются соматический или О-антиген и жгутиковый или Н-антиген.



О-антиген расположен на поверхности бактериальной клетки ипред­ставляет собой термостабильный (не разрушается при кипячении в течение 2 часов) фосфолипидо-полисахаридный комплекс. Он не однороден исо­держит различные антигенные факторы (дидезоксигексозы, или иначе по-лиозиды) на концах полисахаридных цепей, что обуславливает специфич­ность О-антигена в серологических реакциях.

В соответствии с содержанием тех или иных О-антигенов сальмонеллы делят на серологические группы, обозначаемые заглавными буквами латин­ского алфавита. Отдельные антигенные факторы О-антигена обозначаются арабскими цифрами. Некоторые антигенные факторы
О-антигена (далее про­сто О-антигены) называют главными О-антигенами, т.к. они встречаются только в одной из групп сальмонелл и именно они определяют групповую принадлежность бактерий. Другие О-антигены называют малыми, т.к. они встречаются в нескольких или даже многих группах сальмонелл и, следова­тельно, не могут определять их групповую принадлежность. В настоящее время выделено более 50 О-групп сальмонелл.

Одним из компонентов О-антигена является Vi-антиген — полимер N-ацетиламино-гексуроновой кислоты. Он обнаруживается у отдельных се-роваров сальмонелл (S. dublin, S. paratyphi и др.) и некоторых других бакте­рий семейства энтеробактерий (Escherichia, Citrobacter). Vi-антиген затруд­няет серологическую идентификацию сальмонелл в РА, т.к. препятствует агглютинации бактерий в О-сыворотках.

Vi-антиген термолабилен. Он полностью разрушается при кипячении в течение 10 минут, частично инактивируется при нагревании при 60° С в течение часа и под действием фенола, чувствителен к действию соляной кислоты и этанола. Наиболее полное его развитие у соответствующих се-роваров происходит при температуре 37° С.

Жгутиковые или Н-антигены сальмонелл могут существовать в двух, выявляемых в серологических реакциях, фазах: первой и второй (или «спе­цифической» и «неспецифической»).

Антигенные факторы 1-й фазы обозначаются прописными буквами ла­тинского алфавита, антигены 2-й фазы - арабскими цифрами или прописны­ми буквами латинского алфавита с арабскими цифрами. Сальмонеллы, у которых Н-антиген представлен двумя фазами, называются двухфазными, а имеющие антигенные факторы 1-й фазы-монофазными.

Помимо перечисленных основных антигенов, у сальмонелл обнаруже­ны и другие антигены. Среди них — М-антиген (слизистый). Он выявляется у некоторых слизистых штаммов сальмонелл сероваров S. choleraesuis, S. dublin, S. anatum и др. М-антиген — кислый полисахарид. Он нераство­рим в воде, разрушается под действием кислоты и этанола, обладает сла­быми антигенными свойствами.

У ряда сероваров сальмонелл (S. typhimurium, S. choleraesuis,
S. stanley, S. anatum
и др.) показано наличие белково-полисахаридного комплекса, отнесенного к К-антигену. Он устойчив к действию кислоты, этанола и обладает выраженными антигенными свойствами.

У сальмонелл имеется несколько видов антигенных вариаций, знание которых необходимо для получения однородных результатов идентифика­ции и правильной их интерпретации.

Н-О-вариации — переход из жгутиковой НО-формы в безжгутиковую О-форму. Встречается редко, но такой переход почти всегда необратим. Некоторые серовары сальмонелл (S. gallinarum-pullorum) существуют только в О-форме.

S-R-вариации — переход от гладких S-форм к шероховатым
R-формам, сопровождающийся качественными и количественными изменениями О-антигена.

О-вариации — количественные изменения О-антигена. Наиболее часто изменениям подвергаются О-антигены 1,6, и 12. Этот тип вариаций антиге­нов связывают с фаговой конверсией сальмонелл.

V-W-вариации (или Vi-вариации) — количественные изменения
Vi-антигена, влияющие на агглютинабельность культур, содержащих этот анти­ген (V-форма — О — инагглютинабельна из-за большого количества Vi-антигена, W-форма не содержит Vi-антиген и агглютинируется
О-сыворотками, VW — форма является промежуточной, т.е. содержит
Vi-антиген, но является О-агглютинабельной).

Н-вариации — качественные изменения жгутиковых антигенов, в ре­зультате чего отдельные антигенные комплексы, входящие в 1-ю и 2-ю фазы, могут присутствовать или отсутствовать.

При идентификации сальмонелл следует помнить и то, что они могут иметь общие антигены не только в пределах их отдельных О-групп, но и с представителями других родов семейства энтеробактерий (Escherichia, Shigella, Klebsiella, Citrobacter). Несмотря на мозаичность и вариабельность антигенной структуры сальмонелл, при их серологической идентификации во внимание принимаются лишь два ос­новных антигена (О и Н). Этот принцип положен в основу диагностической антигенной схемы Кауфмана-Уайта. В этой схеме, в соответствии со струк­турой О-антигенов, сальмонеллы распределены по О-группам с различным числом сероваров, расположенных в пределах этих О-групп в алфавитном порядке в соответствии с обозначением их Н-антигенов 1-й фазы. Факти­чески схема Кауфмана-Уайта представляет собой каталог антигенов саль­монелл, имеющих первостепенную диагностическую ценность. Краткая схема Кауфмана-Уайта, касающаяся антигенной структуры групп саль­монелл, в которые входят патогенные сероварианты бактерий, представ­лена в таблице 26.

входят патогенные для животных сероварианты

(Bergeys Manual of Determinative Bacteriology, 1994)

Серовар Соматический антиген Жгутиковый антиген (Н)
    (О) фаза 1 фаза 2
Группа А (О2)
S. paratyphi A 1,2, 12 а (1,5)
S. kiel 1,2, 12 g,р -
Группа В (О4)
S. kisangani 1,4, (5), 12 а 1,2
S. hessarek 4,12,27 а 1,5
S. fulica 4,(5), 12 а 1,5
S. arechavaleta 4,(5), 12 а 1,7
S. bispebjerg 1,4,(5), 12 а e, n, x
S. abortusequi 4,12 - e, n, x
S. tinda 1,4, 12,27 а e, n, Z15
S. paratyphi В 1,4,(5), 12 b 1,2
S. Java 1,4,(5), 12 b (1,2)
S. limete 1,4, 12,27 b 1,5
S. сanada 4,12 b 1,6
S. uppsala 4, 12, 27 b 1,7
S. sofia 1,4, 12,27 b (e, n, x)
S. abony 1,4,(5), 12,27 b e, n, x
S. abortusbovis 1,4, 12,27 b e, n, x
S. wagenia 1,4, 12,27 b e, n, Zis
S. schleissheim 4, 12, 27 b -
S. wien 1,4,12,27 b 1, w
S. legem 1,4, 12,27 с 1,5
S. abortusovis 4,12 с 1,6
S. altendort 4, 12, 27 с 1,7
S. bury 4, 12, 27 с Z6
S. stanley 1,4,(5), 12,27 d 1,2
S. schwarzengrund 1,4, 12,27 d 1,7
S. duisburg 1,4, 12,27 d e, n, Z15
S. salinatis 4,12 d, e, h d, e, n, Z15
S. saintpaul 1,4,(5), 12 e, h 1,2
S. reading 1,4,(5), 12 e, h 1,5
S. kaapstad 4,12 e, h 1,7
S. сhester 1,4,(5), 12 e, h с, n, х
S. san-diego 4,(5), 12 e,h e, n, z15
S. derby 1,4,(5), 12 f,g (1,2)
S. agona 1,4, 12 f, g, s -
S. essen 4,12 g, m -
S. caledon 1,4, 12,27 g, m, (s), t e, n, x
S. hato 4,(5), 12 g, m, s -
S. сalifornia 4, 12 g, m, t -
S. kingston 1,4, (5), 12,27 g, s, t (1,2)
S. budapest 1,4,12,27 g,t -
S. banana 4,(5), 12 m, t 1,5
S. typhimurium 1,4, (5), 12 i 1,2
S. lagos 1,4,(5), 12 i 1,5
S. agama 4, 12 i 1,6
S. gloucester 1,4,12,27 i 1, w
S. texas 4, (5), 12 к e, n, zh
S. fyris 4,5, 12 l,v 1,2
S. azteca 4,(5), 12,27 1, v 1,5
S. bredency 1,4,12,27 1, v 1,7
S. kimuenza 1,4, 12,27 1, v e, n, x
S. brandenburg 1,4,12 1, v 1, n, zI5
S. togo 4,12 1, w 1,6
S. vora 1,4, 12,27 e, z]3, z28 1, П, Zl5
S. kunduchi 1,4,(5), 12, 27 e, z13, z28 1,2
S. heidelberg 1,4,(5), 12 r 1,2
S. bradford 4, 12, 27 r 1,5
S. remo 1,4,12,27 r 1,7
S. southampton 1,4, 12,27 r Z6
S. africana 4, 12 r, i 1, w
S. coeln 4,(5), 12 У 1,2
S. teddington 1,4,12,27 У 1,7
S. ball 1,4,(5), 12, 27 У e, n, x
S. jos 1,4,12,27 У e, n, Z15
S. shubra 4,(5), 12 z 1,2
S. kiambu 4,12 z 1,5
S. indiana 1,4,12 z 1,7
S. preston 1,4,12 z 1, w
S. entebbe 1,4, 12,27 z
S. nordenham 1,4, 12,27 z e, n, x
S. Stanleyville 1,4,(5), 12,27 Z4, Z23 (1,2)
S. kalamu 4,12 Z4, Z24 (1,5)
S. haifa 1,4,(5), 12 Z1o 1,2
S. ituri 1,4,12 Z1o 1,5
S. fortune 1,4, 12,27 Z1o Z6
S. brancaster 1,4,12,27 Z29 -
Группа C1(О6, 7)
S. san-juan 6,7 a 1,5
S. austin 6,7 a 1,7
S. denver 6,7 a e, n, Z15
S. brazzaville 6,7 b 1,2
S. edinburg 6,7 b 1,5
S. georgia 6,7 b e, n, Z15
S. leopoldville 6,7 b Z6
S. paratyphi С 6, 7(vi) с 1,5
S. choleraesuis 6,7 (с) 1,5
S. typhisuis 6,7 с 1,5
S. birkenhead 6,7 с 1,6
S. isangi 6,7 d 1,5
S. araersfoort 6,7 d e, n, x
S. gombe 6,7 d e, n, Z15
S. livingstone 6,7 d 1, w
S. larochelle 6,7 e,h 1,2
S. lomita 6,7 e, h 1,5
S. norwich 6,7 e,h 1,6
S. braenderup 6,7 e,h e, n, zis
S. montevideo 6,7 g, m, (p), s (1,2,7)
S. menston 6,7 g, s, t (1,6)
S. haelsingborg 6,7 m, p, t, (u) -
S. oranienburg 6,7 m, t -
S. norton 6,7 i 1, w
S. thompson 6,7 к 1,5
S. daytona 6,7 к 1,6
S. Singapore 6,7 к e, n, x
S. concord 6,7 1, v 1,2
S. irumu 6,7 l,v 1,5
S. bonn 6,7 1, v e, n, x
S. potsdam 6,7 1, v e, n, Z15
S. сolorado 6,7 1, w 1,5
S. nessziona 6,7 1, Zu 1,5
S. kcnya 6,7 1, Z13 e, n, x
S. virchow 6,7 r 1,2
S. infantis 6,7 r 1,5
S. nigeria 6,7 r 1,6
S. colindalc 6,7 r 1,7
S. papuana 6,7 r e, n, z15
S. richmond 6,7 У 1,2
S. bareilly 6,7 У 1,5
S. gatow 6,7 У 1,7
S. mikawasima 6,7 У e, n, z15
S. tosamanga 6,7 z 1,5
S. eaquatoria 6,7 Z4, Z23 e, n, z15
S. inganda 6,7 Z l0 1,5
S. eschwciler 6,7 Zl0 1,6
S. djugu 6,7 Zl0 e, n, x
S.tennessee 6,7 Z29 -
S. arizonae 6,7 - 1,6
Группа C2(06, 8)
S. curacao 6,8 a 1,6
S. nordufer 6,8 a 1,7
S. narashino 6,8 a e, n, x
S. nagoya 6,8 b 1,5
S. gatuni 6,8 b e, n, x
S. banalia 6,8 b Z6
S. wingrove 6,8 с 1,2
S. Utah 6,8 с 1,5
S. bronx 6,8 с 1,6
S. belem 6,8 с e, n, x
S. mucnchen 6,8 d 1,2
S. manhattan 6,8 d 1,5
S. stcrrenbos 6,8 d e, n, x
S. herston 6,8 d e, n, Z15
S. ncwport 6,8 e, h 1,2
S. kottbus 6,8 e, h 1,5
S. tshiongwe 6,8 e,h e, n, z,5
S. sandow 6,8 f,g e, n, Z15
S.chincol 6,8 g, m, s (e, n, x)
S. baragwanath 6,8 m, t 1,5
S. germiston 6,8 m, t e, n, x
S. lindenburg 6,8 i 1,2
S. takoradi 6,8 i 1,5
S. bonariensis 6,8 i e, n, x
S. aba 6,8 i e, n, z15
S. blockley 6,8 к 1,5
S. charlottenburg 6,8 к e, n, Z15
S. litchfield 6,8 1, v 1,2
S.loanda 6,8 1, v 1,5
S. manchester 6,8 1, v 1,7
S. edmonton 6,8 1, v e, n, Z15
S. fayed 6,8 1, w 1,2
S. bovismorbificans 6,8 r 1,5
S. hidalgo 6,8 r e, n, Z15
S. tananarive 6,8 У 1,5
S. praha 6,8 У e, n, zis
S. kuru 6,8 z 1, w
S. chailey 6,8 Z4, Z23 e, n, z15
S. duesseldorf 6,8 Z4, Z24 -
S. tallahassee 6,8 Z4, Z32 -
S. mapo 6,8 Zl0 1,5
S. hadar 6,8 Zl0 e, n, x
S. glostrup 6,8 Zl0 e, n, z15
Группа С3 (08)
S. shipley 8,20 b e, n, z15
S. Virginia d 1,2
S. labadi 8,20 d Z6
S. emek 8,20 g, m, s -
S. kentucky 8,20 i Z6
S. amherstiana 1, v 1,6
S. hindmarsh 8,20 r 1,5
S. altona 8,20 r,(i) Z6
S. alagbon У 1,7
S. corvallis 8,20 Z4, Z23 (Z6)
S. albany 8,20 Z4, Z24 -
S. molade 8,20 Zl0 Z6
S. tamale 8,20 Z29 (e, n, z15)
Группа С4 (О6, 7,14)
S. kaduna 6, 7, 14 с (c, n, z15)
S. eimsbuettcl 6,7, 14 d 1, w
S. gclsenkirchen 6, 7, 14 1, v Z6
Группа D1 (09,12)
S. sendai 1,9, 12 a 1,5
S. miami 1,9, 12 a 1,5
S. onarimon 1,9, 12 b 1,2
S. frintrop 1,9, 12 b 1,5
S. alabama 9, 12 с c, n, Z15
S. typhi 9, 12, (vi) d -
S. ndolo 9, 12 d 1,5
S. eastbourne 1,9, 12 e, h 1,5
S. berta 1,9, 12 f,g,t -
S. entcritidis 1,9, 12 g, m (1,7)
S. blcgdam 1,9, 12 g, m, q -
S. dublin 1,9, 12, (vi) g,P -
S. rostock 1,9, 12 g,P, " -
S. moscow 9, 12 g, q -
S. pcnsacola 1,9, 12 m, t -
S. seremban 9, 12 i 1,5
S. claibornei 1,9, 12 к 1,5
S. mcndoza 1,9, 12 1, v 1,2
S. panama 1,9, 12 1, v 1,5
S. kapemba 9,12 1, v 1,7
S. daressalaam 1,9,12 1, w e, n, x
S. javiana . 1,9, 12 1, Z28 1,5
S. Jamaica 9, 12 r 1,5
S. lawndale 1,9, 12 Z 1,5
S. angola 1,9, 12 Z Z6
S. wangata 1,9, 12 Z4, Z23 (1,7)
S. portland 9, 12 Zl0 1,5
S. gallinarum (pullorum) 1,9, 12 - -
Группа D2 (09,46)
S. baildon 9, 46 a e, n, x
S. wcrnigerode 9, 46 f,g -
S. adabraka 3, 10 Z4, Z23 1,7
S. okerara 3, 10 Zl0 1,2
S. lexington 3, 10 Z l0 1,5
S. coquilhatville 3, 10 Z l0 1,7
S. kristianstad 3, 10 Z l0 e, n, Z15
             

Примечание: в скобки взяты антигенные фазы, имеющиеся непостоянно.

Для серологической идентификации с целью окончательного установ­ления родовой принадлежности и определения сероварианта используют чистые культуры бактерий, отнесенные по морфологическим, культуральным и ферментативным свойствам к роду сальмонелл. Для этих целей био­промышленностью выпускаются наборы сывороток сальмонеллезных О-комплексных и монорецепторных О- и Н-агглютинирующих для экспресс-идентификации сальмонелл в РА на стекле. Эти наборы позволяют опреде­лить родовую и серовариантную принадлежность 33 групп сальмонелл, наиболее часто выделяемых от животных, из продуктов животного проис­хождения и объектов внешней среды.

Набор № 1 Набор № 2
Номер О- комплекепых сывороток Реценторный состав комплексных сывороток Монорецепторные сыворотки
    О Н
          I фаза II фаза
4,7,8,9,10,15,19 i m e, n, x
4,11,16,17,18,21,28 c t
7,11,30,35,38,39,40 r р
8,16,30,41,42,43,44 e h
9,17,35,41,45,47,48 l v (1,2,5,6)
10,18,38,42,45,50,52   d  
15,21,39,43,47,50,53   b  
19,23,40,44,48,52,53   g  

Сыворотки выпускают двумя наборами. В набор № 1 входят О-комплексные сыворотки № 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 и 8. В набор № 2 входят О- и Н-монорецепторные сыворотки.






Сейчас читают про: