Методика определения групп крови

Совместимость групп крови

В связи с большой степенью разведения вливаемой боль­ному крови донора, вводимая плазма не оказывает ника­кого влияния на эритроциты реципиента. Только эритро­циты донора могут агглютинироваться сывороткой реци­пиента, а не наоборот — это правило Оттенберга. Однако при большом переливании крови от универсального доно­ра 0(I) резко обескровленному больному, да еще в случае высокого титра агглютининов переливаемой крови (1:200 и выше) это правило может подвести больного и врача. Перелитая плазма недостаточно будет разведена плазмой больного и может вызвать у него гемолиз эритроцитов, то есть произойдет обратная агглютинация и обратный гемолиз и будут агглютинироваться не влитые эритроциты, а эритроциты реципиента, что вызовет гемолитический шок.

Стандартные сыворотки определяют специфический агглютиноген, а стандартные эритроциты — агглютинин.

Итак, определение группы крови можно производить по стандартным сывороткам и стандартным эритроцитам.

Обычно пользуются стандартными сыворотками 0(I), А(II), В(III), AB(IV).

Признаки пригодности сыворотки:

■ она должна быть специфической, то есть содержать строго определенные агглютинины — 1, В;

■ сыворотка должна быть активной и иметь титр 1:32 для эритроцитов А1 и В и не менее 1:16 для эритро­цитов А2;

■ сыворотка должна быть светлой и прозрачной;

■ в сыворотке не должно быть признаков гниения;

■ сыворотка должна иметь паспортизацию: группу, титр, срок годности, серию, место приготовления.

Помещение, где проводится определение группы кро­ви, должно быть светлым, с температурой от 15 до 25 ^оС.

На тарелку или предметное стекло наносятся пипет­ками (разными!) по 1-й крупной капле сыворотки 0(I), А(II), В(Ш). Заметив время, чистой стеклянной палоч­кой или чистым углом предметного стекла капли сыво­роток соединяются с каплями крови. Определение длит­ся 5 минут, покачивая тарелку, затем к каждой смеси капель добавляют по 1-й капле физраствора и оценивают результаты. Лучше, если сыворотка будет 2-х различных серий. Результаты групп крови должны совпадать в обе­их сериях сыворотки.

Оценка результатов изогемагглютинации:

■ при положительной реакции в смеси появляются мельчайшие красные зернышки склеивающихся эрит­роцитов. Зернышки сливаются в более крупные зер­на, а последние — в хлопья. Сыворотка почти обесц­вечивается;

■ при отрицательной реакции смесь в течение 5 мин ос­тается равномерно окрашенной в розовый цвет и ни­каких зернышек не обнаруживается;

■ при работе с 3 сыворотками групп 0(I), А(П), В(Ш) возможны 4 комбинации реакций:

— если все 3 сыворотки дали отрицательную реакцию, то есть смесь равномерно окрашена в розовый цвет — это 0(I) группа крови;

— если отрицательную реакцию дала только сыворот­ка группы А(П), а сыворотки 0(I) и В(Ш) дали поло­жительную реакцию, то есть появились зерна — это А(II) группа крови;

— сыворотка группы В(П) дала отрицательную реак­цию, а сыворотки группы 0(I) и А(П) дали положи­тельную — это В(Ш) группа крови.

— все 3 сыворотки дали положительные реакции — испытуемая кровь AB(IV) группы. В этом случае про­водится исследование с сывороткой AB(IV) группы.

Обратите внимание! Капли исследуемой крови дол­жны быть в 5-10 раз меньше капель сыворотки.

Ошибки изогемагглютинации.

Невыполнение агглютинации, где она должна быть, и наличие агглютинации, где ее быть не должно. Это мо­жет быть при слабом титре сыворотки плюс плохая агг­лютинация эритроцитов.

Наличие агглютинации, где ее быть не должно, — это псевдоагглютинация, когда кучки эритроцитов образу­ют «монетные столбики». Покачивание тарелки или до­бавление физраствора их разрушают.

Панагглютинация, когда сыворотка склеивает все эрит­роциты, в том числе и своей группы крови. К 5-й минуте признаки агглютинации исчезают.

Имеется еще так называемая холодовая панагглютинация, когда склеивание эритроцитов происходит из-за низкой температуры воздуха (ниже 15 °С) в по­мещении.

Во всех этих случаях проводят либо повторную реак­цию, либо по стандартным эритроцитам.

Лекция 17. Резус-фактор