О резус-факторе

Генетика - (от греч. - относящийся к происхождению) - наука о наследственности и изменчивости организмов.

ГЕН - (от греч. род, происхождение) - единица структурной и функциональной наследственности, представляющая собой отрезок молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК). Факт существования гена установил Г.Мендель (1866). Он пришел к заключению, что любые признаки организма определяются факторами, которые передаются от родителей к потомкам через половые клетки, и что эти факторы при скрещивании не дробятся, а передаются как нечто целое независимо друг от друга. Появление разных признаков обусловлено различным сочетанием наследственных факторов, причем частоту появления каждого признака можно предсказать, зная, как он наследуется. Наследственность - свойство организмов передавать следующему поколению присущие данному организму особенности становления (в ходе своего исторического развития) определенных черт строения и типа обмена веществ. Передача особенностей организма следующим поколениям возможна только в процессе размножения и самовоспроизведения.

Изменчивость - свойство живых организмов, заключающееся в изменении генов и их проявления в процессе развития организма, т.е. изменчивость является свойством, противоположный наследственности.

Судебная медицина изучает и разрабатывает различные проблемы биологии и естествознания, применительно к требованиям юридических и медицинских наук. Вместе с тем судебная медицина заимствует многие методы исследования из патологической анатомии, криминалистики, физики, химии, биологии, и тесно связана с ними.

В последние десятилетия был разработан принципиально новый метод установления личности, основанный на анализе ДНК человека - метод ГЕНОТИПОСКОПИИ (геномной ИДЕНТИФИКАЦИИ, ДНК-дактилоскопии).

Технология этой биологической идентификационной экспертизы базируется на современных разработках молекулярной биологии и генной инженерии, а научной основой являются различия в структуре ДНК разных индивидов. Экспертную значимость данного метода трудно переоценить. Используемые в настоящее время методы (биохимические, иммунологические и др.) носят лишь условный характер и ограничиваются установлением групповой принадлежности исследуемых биологических объектов, тогда как геномный метод идентификации позволяет перейти в экспертной практике к прямому позитивному установлению личности. Метод имеет различные названия: "ДНК-дактилоскопия", "геномная дактилоскопия", "генотипоскопия" (смотрю генотип).

Судебно-медицинским экспертам и юристам необходимо знать основы и возможности данного метода исследования. В данной статье авторы предприняли попытку в доступной форме осветить эту тему.

Первые сообщения о возможности использования анализа молекулы ДНК для идентификации человека сделал в середине 80-х годов ученый из Великобритании А.Дж.Джеффрейс (A.J.Jeffreys). Как известно, индивидуальность личности обусловлена свойствами, переданными по наследству. Носителем наследственной информации (генетического кода) является дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК).

Общие принципы медицинской генетики схематично представляются следующим образом. В ядрах клеток содержатся хромосомы (хромосомы - видимые в световом микроскопе палочковидные структуры), состоящие из многих тысяч генов. У человека каждая соматическая (т.е. не половая) клетка содержит 46 хромосом, представленных 23 парами. Одна из пар - п о л о в ы е хромосомы (X и Y) - определяют пол индивида. В ядрах соматических клеток женщин имеются две

X-хромосомы, а мужчин - одна X- и одна Y- хромосома.

Основные единицы передаваемого по наследству признака (наследственности) - г е н ы (участки молекулы ДНК). Механизм передачи наследственной информации основан на способности ДНК к самоудвоению (репликации). Гены расположены вдоль хромосом линейно, причем каждый ген занимает строго определенное место (локус).

Принципиальная возможность метода основывается на индивидуальности строения некоторых участков молекулы ДНК, которые назвали гипервариабельнымиучастками (ГВ). Графическая индивидуальность геномного отпечатка определяется числом полос, их расположением на дорожке, относительной интенсивностью и морфологией каждой полосы.

Строение этих отрезков молекул не только индивидуально у каждого человека, но и строго повторяется во всех его органах и тканях. Поскольку для каждого человека характерен свой, присущий только ему, набор гипервариабельных участков генома, их картина может служить своего рода "генетическим удостоверением личности".

Теоретически метод генотипоскопической идентификации является самым универсальным, т.к. с его помощью, в принципе, можно идентифицировать самые различные объекты биологического происхождения, если только в них сохранилось небольшое количество молекул ДНК или их частей.

Используя высокоэффективные технические средства, можно получать результат с вероятностью ошибки меньшей, чем один раз на несколько миллиардов (!) случаев. Т.е. выделять одного единственного человека из всего множества живущих на Земле.

Главным компонентом исследования является специальный молекулярный зонд, выявляющий различия в структуре ДНК разных людей. Существует несколько вариантов технологии проведения исследований молекулы ДНК в целях идентификации человека. Один из них основан на анализе полиморфизма длин рестрикционных фрагментов ДНК (фрагментов, получаемых путем рассечения молекулы). Сокращенно его называют ПДРФ анализ (используют для исследования жидкой крови).

Технология такого исследования в общих чертах состоит из нескольких этапов:

1. Выделение молекул ДНК из исследуемого объекта (молекулы ДНК находятся в ядрах клеток в структуре ДНК).

2. Фрагментирование (разделение на фрагменты) молекул ДНК с помощью ферментов - РЕСТРИКТАЗ (эндонуклеаз). Существует множество видов рестриктаз, которые разрезают молекулу ДНК в местах, присущих только им, т.е. каждый вид рестриктазы только в том месте, в котором ему положено его химической природой. После такого воздействия на молекулу ДНК, образуется множество фрагментов, которые отличаются друг от друга составом, длиной и, соответственно, молекулярным весом.

3. Смесь фрагментов ДНК разделяют методом электрофореза в геле. Метод основывается на том, что под воздействием электрического тока фрагменты ДНК передвигаются в специальной среде - геле. Чем они легче и мельче, тем дальше они уходят от стартовой позиции.

4. Из всего набора фрагментов, расположенных на разных участках электрофоретической пластинки, с помощью специальных зондов выявляют полиморфные фрагменты. Зонды при этом обычно маркируют радиоактивными изотопами или не радиоактивными метками. Это позволяет получить на специальной мембране видимый набор линий разной ширины, соответствующих числу и виду гипервариабельных (ГВ) фрагментов. Расположение отдельных линий варьирует у разных людей, а их совокупность индивидуальна.

Целесообразно производить параллельное исследование известного по происхождению объекта (от А) и неизвестного (от Х). Полученные "картинки" распределения ГВ фрагментов сравнивают между собой с использованием методов математического анализа. Рассчитывают возможность случайного совпадения изображений. При очень маленькой вероятности случайного совпадения ею пренебрегают и считают, что сравниваемые объекты идентичны, а следовательно установлена личность человека, от которого произошел ранее неизвестный объект Х.

Метод позволяет сравнивать между собой результаты исследования неизвестных молекул ДНК из ядер клеток крови, спермы и любых других тканей тела человека. "КАРТИНКА" РАСПОЛОЖЕНИЯ ГВ-фрагментов НЕ ИЗМЕНЯЕТСЯ НА ПРОТЯЖЕНИИ ВСЕЙ ЖИЗНИ ЧЕЛОВЕКА, ОНА ИНДИВИДУАЛЬНА. Полное сходство "ДНК-узоров" наблюдается только у однояйцевых близнецов. У родственников выявляется сходство генотипических узоров, что позволяет устанавливать родство.

По данным Экспертно-криминалистического центра МВД России (ЭКЦ МВД РФ) и Республиканского Центра судебно-медицинской экспертизы МЗ России (РЦ СМЭ РФ) в последнее время разработан и активно внедряется в экспертную практику метод, позволяющий проводить исследование очень малых количеств разрушенных молекул ДНК. Метод основан на том, что перед исследованием ГВ-участков имеющиеся фрагменты ДНК многократно копируются (наращиваются) до необходимого объема материала, подлежащего для исследования. Этот метод получил название - метод амплификации (реакции цепной полимеризации).

С внедрением в практику этой модификации генотипоскопии было устранено одно из существенных препятствий на пути практического судебно-медицинского и криминалистического использования метода, заключающегося в ограничениях материала, необходимого для исследования, по объему и качеству.

Метод генотипоскопии открывает широкие возможности использования его в целях расследования и раскрытия преступлений, установлению личности и решении других задач. Он, в частности, позволит:

1. Устанавливать происхождение крови, спермы и некоторых других биологических объектов от конкретного лица.

2. Устанавливать, могут ли конкретные мужчина и женщина быть родителями ребенка.

3. Объединять преступления, если их совершало одно и то же лицо и оставило следы биологического происхождения, например сперму.

4. Определять, не наступила ли беременность от лица, подозреваемого в совершении изнасилования.

5. Устанавливать конкретных участников событий в случаях обнаружения смешанных следов биологического происхождения. Т.е. эксперт может при необходимости определить, что данное конкретное пятно крови образовано кровью нескольких лиц и указать конкретно каких.

6. Определить, относятся ли части расчлененного трупа, одному или разным лицам.

Метод высокоэффективен как идентификационный, позволяющий так же с большой вероятностью определять кровнородственные связи и устанавливать структуру родословных.

По результатам генотипоскопического метода исследования возможны следующие выводы эксперта:

1. Происхождение исследованного объекта от конкретного лица исключается.

2. Установлена идентичность молекул ДНК в исследуемом объекте и образце, взятом от лица А. Следовательно исследованный объект произошел от лица А.

При установлении этим методом родителей ребенка возможны несколько вариантов ответов:

1. Исключается происхождение ребенка от одного из предполагаемых родителей.

2. Исключается происхождение ребенка от обоих предполагаемых родителей.

3. Биологическими родителями ребенка являются конкретные мужчина и женщина.

Положительный вывод делается экспертом в случае установления очень маленькой вероятности случайного совпадения полиморфных полос (менее чем 10).

Уже накоплен достаточный опыт практического использования данного метода при расследовании уголовных и гражданских дел.

К примеру, в ЭКЦ МВД РФ была проведена экспертиза по определению видовой и половой принадлежности фрагментов кожных лоскутов, обнаруженных в одном из лесных массивов. Методом генотипоскопии было установлено, что кожа принадлежит мужчине. В ходе оперативно-розыскных мероприятий была выявлена семья Б., в которой пропал пятнадцатилетний мальчик. Генотипоскопическим исследованием крови мужа и жены Б. и кожных фрагментов неизвестного мужчины, с использованием метода амплификации, было установлено, что неизвестный является сыном мужа и жены Б.

Генотипоскопический метод был использован и в известной широко масштабной экспертизе костных останков, обнаруженных под Екатеринбургом в 1979 году А.Н.Авдониным и Г.Т.Рябовым.

Многочисленными видами судебно-медицинских экспертиз, в т.ч. и генетическими, была установлена истина - это останки последнего Российского Императора и членов его семьи.

Из костной ткани удалось выделить ДНК в количестве, достаточном для проведения исследования. Неоднократными генотипоскопическими исследованиями в различных крупнейших генетических лабораториях мира (Великобритании, США и Канады) было установлено, что обнаруженные вблизи г.Екатеринбурга костные останки принадлежат семье последнего Российского Императора Николая II, и членам его семьи.

Метод можно назвать революционным. Уже научно подготовлено более широкое его использование в решении многообразных задач идентификации личности человека по следам и объектам биологического происхождения. Наука и практика получила универсальный метод групповой и индивидуальной идентификации объектов живой природы.

Исследование спермы в жидком виде, в мазках, в семенных пятнах проводится при расследовании половых преступлений, при определении способности к оплодотворению, в бракоразводных и алиментных делах. Обычно на разрешение судебно-медицинской экспертизы ставятся два основных вопроса:

* имеется ли сперма на вещественном доказательстве (НАЛИЧИЕ СПЕРМЫ)?

* какова групповая принадлежность спермы (ВОЗМОЖНОСТЬ ИСКЛЮЧЕНИЯ ПРОИСХОЖДЕНИЯ СПЕРМЫ ОТ КОНКРЕТНОГО ЧЕЛОВЕКА)?

Наиболее часто пятна спермы обнаруживаются на постельном и нательном белье, на верхней одежде, в мазках и тампонах из влагалища, прямой кишки и полости рта. Обнаружение спермы в мазках и тампонах является доказательством полового сношения, в прямой кишке и полости рта - при совершении полового акта в извращенной форме. Нахождение спермы на теле и одежде лиц, не живущих половой жизнью, может служить важным доказательством при раскрытии полового преступления. Мазки и тампоны необходимо брать как можно скорее, т.к. сперма недолго сохраняется. При осмотре места происшествия можно пользоваться т.н. предварительными пробами (осмотр в лучах ртутно-кварцевой лампы или проведение пробы с йодом /проба Флоренса/ или пикриновой кислоты /проба Барберио/), но они не являются специфичными для спермы и поэтому имеют лишь ориентировочное значение.

Доказательством присутствия спермы в пятнах является обнаружение в них при микроскопическом исследовании целых сперматозоидов (хотя бы ОДНОГО).

Для обнаружения спермы в пятнах существуют методы, о которых юристам необходимо знать. Это - метод электрофореза на бумаге и гистохимический метод. МЕТОД ЭЛЕКТРОФОРЕЗА НА БУМАГЕ позволяет устанавливать пятна спермы давностью в 2 месяца и дифференцировать ее от влагалищной смазки и мочи. ГИСТОХИМИЧЕСКИЙ МЕТОД позволяет обнаружить сперму в пятнах давностью до 6 месяцев. Он основан на избирательной окраске ДНК сперматозоидов и микрообразователей, содержащихся в пятнах спермы.

Для решения вопроса о принадлежности следов спермы определенному лицу проводится установление ее групповой принадлежности. Известно, что ГРУППОВАЯ СПЕЦИФИЧНОСТЬ ВЫДЕЛЕНИЙ КАЖДОГО ЧЕЛОВЕКА, в том числе и спермы, ВСЕГДА СОВПАДАЕТ С ГРУППОЙ КРОВИ. Причем, у разных людей содержание агглютиногенов АВО в выделениях неодинаково: одни "выделяют" их в большем количестве, другие - в меньшем. Степень "выделения" агглютиногенов в выделениях отдельных лиц определяется путем исследования их слюны. Если окажется, что подозреваемое лицо является "не выделителем", то можно исключить принадлежность ему спермы в пятне даже при условии совпадения групповых свойств этой спермы с его кровью. Поэтому, кроме вещдоков с пятнами, подозрительными на сперму, в лабораторию следует направлять образцы крови и слюны потерпевшей и обвиняемого.

Исследование волос производится в случаях, когда на месте происшествия (при убийствах, изнасилованиях, ДТП и др.) на одежде или теле потерпевшего, орудиях травмы или транспортных средствах, обнаруживают волосы, принадлежащие потерпевшему или обвиняемому, а может и иному лицу. Но для полного выяснения всех обстоятельств такие вещественные доказательства изымают.

ВОЛОСЫ - роговое образование кожи. Часть волоса, находящаяся в коже - корень, который заканчивается утолщением - луковицей. Выступающая наружу часть волоса называется стволом или стержнем. Ствол волоса состоит из трех слоев: сердцевины, коркового слоя и наружного слоя черепицеобразно расположенных клеток - кутикула.

Волосы человека по ряду признаков отличаются от волос животных, что позволяет их дифференцировать. Обладают определенными отличиями волосы с разных областей тела, что позволяет устанавливать региональное происхождение волоса, т.к. волосы каждого человека с какой-то конкретной области тела имеют определенное сходство между собой, но не бывает двух совершенно тождественных волос. В то же время волосы разных людей могут быть очень сходными.

Волосы на месте происшествия при хорошем освещении обнаруживаю или невооруженным глазом или с помощью лупы. Факт обнаружения волоса (волос) фиксируется в протоколе, после чего волос (волосы) изымают пальцами или пинцетом с резиновыми наконечниками и помещают в конверты (пакеты), на которых указывают кто, где, когда изъял волос (волосы) и их количество).

При необходимости сравнения волосы изымаются у подозреваемых и потерпевших: с 5 областей головы - лобной, теменной, затылочной, правой и левой височных (срезаются ножницами у основания волос по 15-20 волос). Могут быть взяты волосы и с других частей тела, если в этом есть необходимость. Образцы волос упаковываются отдельно и вместе с постановлением о назначении экспертизы направляются следователем в судебно-медицинскую лабораторию.

Микроскопическое исследование позволяет установить способ отделения волоса, его повреждение и изменения. К примеру, при обрыве волоса медленным движением образуется ступенеобразный конец, причем внутренняя поверхность ступени бывает неровной. Конец волоса, оборванного быстрым движением, либо ровный, либо ступенеобразный, причем внутренняя поверхность ступени всегда ровная.

Зазубренность и бугристая поверхность отделения свидетельствует о нарушении целости волоса каким-либо режущим или острым орудием.

При действии высокой температуры обычно микроскопически видимые изменения наступают от ее воздействия при 200 градусах С в течение 10 секунд. При более длительном воздействии такой температуры волос скручивается, рыжеет и при температуре 240 градусов С обугливается.

ПРИМЕРНЫЙ ПЕРЕЧЕНЬ ВОПРОСОВ ПРИ ЭКСПЕРТИЗЕ ВОЛОС:

* являются ли обнаруженные объекты волосами?

* какова видовая принадлежность волос? (человека или животного).

* какова региональная принадлежность волос?

* каков способ отделения волос (вырваны, выпали, отрезаны, оборваны и т.д.)?

* каким предметом они были отделены (тупым, с острым краем и т.д.).

* какова групповая и половая (при сохраненной луковице с оболочками) принадлежность волос?

* имеются ли повреждения или изменения волос (окраска, завивка, обесцвечивание)?

* сходны ли обнаруженные волосы с волосами потерпевшего и подозреваемого и кому из них они могли принадлежать?

* при наличии луковиц провести генно-идентификационное исследование.

В процессе судебно-медицинских экспертиз волос разрешается вопрос НЕ О ТОЖДЕСТВЕ, а лишь О СХОДСТВЕ волос. Здесь возможны два варианта выводов:

1. Волосы НЕ СХОДНЫ между собой и, следовательно, происходят от разных людей.

2. Волосы СХОДНЫ И МОГУТ ПРИНАДЛЕЖАТЬ ОДНОМУ И ТОМУ ЖЕ ЧЕЛОВЕКУ.