2015-01-30
1940
Для флавоноидов не существует универсального метода выделения из растительного сырья. В каждом конкретном случае учитываются свойства выделяемых веществ, сопутствующие вещества и особенности растительного сырья.
Для выделения флавоноидов проводят экстрацию ЛРС одним из подходящих растворителей: этанолом, метанолом, горячей водой или спирто-водной смесью.
Для очистки и разделения используют:
1) избирательную экстракцию;
2) осаждение солями тяжелых металлов;
3) хроматографические методы.
ВЫДЕЛЕНИЕ ФЛАВОНОИДОВ ИЗ ЛРС
С использованием избирательной экстракции (схема 9)
1. Экстракция суммы флавоноидов из ЛРС (70%,80% этанолом или метанолом).
2. Отгонка спирта под вакуумом до водного остатка.
3. Очистка полученной суммы флавоноидов СCl4 от липофильных веществ.
4. Разделение флавоноидов на фракции растворителями с возрастающей полярностью:
1) экстракция агликонов этиловым эфиром;
2) экстракция моногликозидов этилацетатом;
3) экстракция биозидов, триозидов и др. полярных флавоноидов н-бутанолом.
5. Разделяют полученные фракции с помощью колоночной хроматографии на полиамидном сорбенте, силикагеле или целлюлозе. Элюирование веществ проводят смесью хлороформа с этанолом или спирто-водными смесями с возрастающей концентрацией спирта.
Контроль за ходом разделения флавоноидов проводят методом хроматографии: используют ТСХ, БХ или высокоэффективную газожидкостную хроматографию. Наиболее подходящими системами для БХ флавоноидов являются:
15%, 60% РАСТВОРЫ УКСУСНОЙ КИСЛОТЫ;
БУТАНОЛ - УКСУСНАЯ КИСЛОТА - ВОДА (4:1:5).
Для ТСХ: ХЛОРОФОРМ-МЕТАНОЛ (8:2).
6. Установление структуры выделенных соединений проводят с помощью физико-химических методов:
· определение температуры плавления;
· определение удельного вращения (гликозидов);
· сравнение УФ-, ИК-, масс-, ПМР-спектров со спектрами известных образцов.
КАЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Для обнаружения флавоноидов в ЛРС используют химические реакции и хроматографию. Химические реакции подразделяются на цветные и реакции осаждения.
