ЗАНЯТИЕ 15. «Лабораторный контроль состояния обмена липидов»
Цель занятия. Изучить механизмы мобилизации, распада и синтеза триацилглицеридов в жировой ткани, пути образования и использования ацетил-КоА, а также регуляцию этих процессов. Научиться использовать эти знания для объяснения энергетической функции липидов, понимания патогенеза некоторых форм ожирения; связывать обмен липидов с углеводным обменом и объяснить причины кетонемии и кетонурии при некоторых физиологических состояниях. Освоить технику расчета энергетического эффекта окисления триацилглицеридов. Овладеть количественным методом определения ЛПНП и понимать клинико-диагностическое значение результатов.
Студент должен знать:
1. Механизм тканевого липолиза: определение, химизм процесса, гормонозависимый фермент, конечные продукты, гормональную регуляцию мобилизации жира.
2. Структуру, состав и функции бурой жировой ткани
3. Сравнение гликогена и жира как запасаемых энергоносителей.
4. Как инициируется перекисное окисление ненасыщенных жирных кислот.
|
|
5. Химизм олкисления глицерина до конечных продуктов, энергетический эффект процесса.
6. Химизм b-окисления жирных кислот, его локализацию, регуляцию и энергетический эффект.
7. Пути использования ацетил-КоА.
8. Химизм биосинтеза жирных кислот, связь процесса с окислением углеводов и регуляцию.
9. Химизм депонирования жира, связь с окислением углеводов и регуляцию, особенности биосинтеза жира в различных тканях, тип липопротеидов, транспортирующих жир из органа.
10. Механизм и локализацию образования кетоновых тел, регуляцию и биологическое значение.
11. Возможные причины кетоза (кетонемии и кетонурии), связь его с обменом углеводов.
12. Особенности резистентности и склонности к кетозу у детей.
Студент должен уметь:
1. Связывать процессы депонирования, мобилизации жира в тканях, синтез кетоновых тел с углеводным обменом.
2. Объяснить причину кетонемии при голодании, физической нагрузке и сахарном диабете.
3. Количественно определить липопротеины низкой плотности (ЛПНП) в сыворотке крови и анализировать полученные результаты.
Сведения из базовых дисциплин, необходимые для изучения темы:
1. Реакции радикального замещения. Цепные процессы.
2. Реакции элиминирования (дегидрирования).
3. Морфологические особенности бурого жира.
Аудиторная работа:
Лабораторная работа ( количественное определение ЛПНП, обнаружение
кетоновых тел)
1. Количественное определение липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) в сыворотке крови имеет клинико-диагностическое значение, так как количество ЛПНП крови связано с гиперхолестеринемией, поскольку холестерол входит главным образом в состав этой фракции. Увеличение содержания ЛПНП (гиперлипопротеинемия IIа, IIб и III типов) наблюдается при атеросклеротическом поражении сосудов. Нормальное содержание ЛПНП в сыворотке крови: 3,5 –5,8 г/л
|
|
Принцип метода: в присутствии хлорида кальция гепарин избирательно осаждает ЛПНП. Интенсивность образующегося помутнения пропорциональна их содержанию.
Ход работы: в пробирке №1 (опыт) смешивают 2 мл 0,277 % раствора СаСl2, 0,2 мл исследуемой сыворотки и 0,04 мл 1% раствора гепарина.
В пробирке №2 (контроль) смешивают 2 мл 0,277% раствора СаСl2, 0,2 мл исследуемой сыворотки и 0,04 мл дистиллированной воды. Тщательно смешивают и через 4 минуты измеряют оптическую плотность помутневшей опытной и контрольной проб на фотоэлектроколориметре в кювете с толщиной оптического слоя 5 мм при красном светофильтре против воды. Расчет осуществляется по формуле А = (Ео - Ек) х 10, где
А – концентрация ЛПНП, г/л;
Ео - экстинция опытной пробы;
Ек - экстинкция контрольной пробы;
10 – коэффициент пересчета.
Оформите результаты в виде протокола. Сравните с нормой. Выскажите предположения о состоянии липидного обмена.