Занятие №8 таблица индикаторного определения осадка сахара в растворе

Тема: Патофизиология печени.

Цель: Изучить причины и механизм развития недостаточности печени, формирование симптомов и синдромов при заболеваниях печени.

Теоретические вопросы.

1.Основные функции печени и экспериментальное моделирование их нарушений.

2.Печеночная недостаточность, определение понятия, классификация.

3.Этиология и патогенез печеночной недостаточности.

4.Патогенетические варианты печеночной недостаточности (холестатическая, печеночно-клеточная, смешанная).

5.Синдром печеночно-клеточной недостаточности, причины, проявления, методы диагностики.

6.Нарушения обмена веществ при печеночной недостаточности.

7.Нарушения барьерной и дезинтоксикационной функции печени.

8.Печеночная кома, виды, этиология, патогенез, стадии.

9.Портальная гипертензия, причины, механизм развития, проявления, последствия для организма.

Работа №1. Нарушение синтеза гликогена в печени при экспериментальной четыреххлористой интоксикации.

Материальное оснащение.

1. 50%-ный масляный раствор CCl4	- 5 мл
2. Шприц на 2 мл	- 2 шт.
3. Пинцеты глазные	- 2 шт.
4. Ножницы глазные	- 2 шт.
5. Пробирка градуированная	- 2 шт.
6. Стеклянная палочка	- 2 шт.
7. 3%-ный раствор глюкозы	- 10 мл
8. Раствор Бенедикта	- 15 мл
9.Термостат, установленный на 380С	- 1 шт.
10. Водяная баня	- 1 шт.

Методика проведения опыта.

Четыре раза с суточным интервалом кролику вводят внутримышечно 50%-ный масляный раствор четыреххлористого углерода из расчета 0,4 мл чистого препарата на 1 кг массы тела, в результате чего развивается дистрофия печени. Берутся 2 кусочка печени здорового и пораженного кролика, растираются в пробирке стеклянной палочкой и заливают 3%-ным раствором глюкозы. Пробирки ставят на 30 минут в термостат.

После чего в каждую пробирку наливают по 5 мл раствора Бенедикта и 8 капель надосадочной жидкости, проба кипятится в течение 5 минут. Изменение концентрации сахара определяют по цвету осадка в пробирке. Полученные результаты обсуждаются и делаются выводы.

Таблица индикаторного определения осадка сахара в растворе

Зелено-желтое окрашивание	следы глюкозы
Бледно-зеленое окрашивание	0,08 – 0,1%
Коричнево-зеленое окрашивание	0,5%
Желтое окрашивание	1%
Красное окрашивание	2%

Работа №2. Характеристика общетокси­ческого действия желчи.

Материальное оснащение:

1. Шприц на 5 мл – 1 шт.

2. Препаровальная игла - 1 шт.

3. Цельная желчь (бычья) - 10 мл

4. Животные: лягушка - 1 шт.

Методика проведения опыта:

Лягушке вводят в подкожное лимфатическое пространство 2-3 мл желчи. Через 10-15 мин появляется резкая затор­моженность: животное становится не способным перевертываться со спины на живот. При этом оно слабо реагирует на уколы иглой.

Работа №3. Влияние желчи на время рефлекса по Тюрку.

Материальное оснащение.

1. Шприц на 1 мл - 1 шт.

2. Ножницы большие - 1 шт.

3. Штатив с лапкой и крючком - 1 шт.

4. Секундомер - 1 шт.

5. 1% раствор серной кислоты в

стакане - 50 мл

6. Дистиллированная вода в

стакане - 50 мл

7. Цельная желчь (бычья) - 10 мл.

8. Животные: лягушка - 1 шт.

Методика проведения опыта:

Лягушку декапитируют и подвешивают за нижнюю челюсть к штативу. Нижнюю лапку обездвиженного животного погружают в 1% раствор серной кислоты 2-3 раза с интервалом в 5 мин. После каждого погружения конечность обмывают дистиллированной водой.

В исходном состоянии определяют среднее время рефлекса для указанного раздражения. Затем в лимфатическое пространство лягушки вводят 1 мл желчи и через 15 мин опыт повторяют. Результаты, полученные до и после введения лягушке желчи, сопоставляют. При обсуждении экспериментальных данных объясняют механизм изменения скорости проведения раздражающих импульсов по спинальной рефлекторной дуге при действии компонентов желчи.

Работа №4. Влияние желчи на деятельность сердца лягушки.

Материальное оснащение:

1. Деревянная дощечка для фиксации

лягушки - 1 шт.

2. Булавки - 10 шт.

3. Препаровальная игла - 1 шт.

4. Пинцеты глазные - 2 шт.

5. Ножницы глазные - 1 шт.

6. Часовое стекло - 1 шт.

7. Кимограф с лентой из белой

бумаги - 1 шт.

8. Чернила - 10 мл

9. Стеклянный чернильный писчик – 1 шт.

10. Рычажок Энгельмана - 1 шт.

11. Шприц на 2 мл с длинной иглой - 1 шт.

12. 10% раствор желчи на физиоло­гическом растворе - 5 мл

13. 0,5% раствор новокаина - 5 мл

14. 0,65% раствор хлорида натрия - 100 мл

15.Раствор Рингера – 100 мл

16. Животные: лягушки - 2 шт.

Методика проведения опыта.

Две обездвиженных (разрушением спинного мозга) лягушки укрепляют на дощечке булавками брюшком вверх. Затем вскрывают грудную клетку, обнажают сердце, которое соединяют с рычажком Энгельмана для записи сердечных сокращений на ленте кимографа.

У первой лягушки после записи сердечных сокращений на поверхность сердца наносят несколько капель желчи и продолжают регистрацию этого параметра.

У второй лягушки также записывают сокращение сердца в исходном состоянии, а затем на его поверхность наносят 3-5 ка­пель 0,5% раствора новокаина и через 5 мин после нанесения 5-7 капель раствора желчи вновь регистрируют число сердце­биений. После каждой аппликации желчи сердце отмывают физио­логическим раствором.

У первой лягушки вырезают сердце, помещают его на часовое стекло с раствором Рингера и подсчитывают число сердечных сокращений в 1 мин. Затем в раствор Рингера добавляют 2-5 капель желчи и продолжают регистрацию сердцебиений.

Полученные результаты сопоставляют. Кривую записи на кимографе сердечных сокращений зарисовывают в тетрадях. В заключении обсуждаются вероятные механизмы изменений функции сердца под действием желчи.

Работа № 5. Влияние желчи на кровь.

Материальное оснащение:

1. Пробирки простые - 2 шт.

2. Пипетка на 1 мл - 1 шт.

3. Штатив на 5 гнезд - 1 шт.

4. Цитратная кровь (кровь смешивают

с 3,8% раствором цитрата натрия в

соотношении 9:1) -2 мл

4. 0,85% раствор хлорида натрия - 100 мл

5. Желчь (цельная) - 5 мл

Методика проведения опыта.

В две пробирки наливают по 0,5 мл цитратной крови, которую смешивают с физиологическим раствором в соотношении 1:4. Одну пробирку оставляют вкачестве контрольной, а в другую - добавляют несколько капель желчи, что ведет к гемолизу эритро­цитов ("лаковая" кровь).

В заключении обсуждаются возможные механизмы гемолитического действия компонентов желчи.