2015-03-08
579
1.Протеомика – новое направление в биохимии и молекулярной биологии. Протеом человека.
2. Методы установления первичной структуры белков.
3. Современные методы количественного определения белка в биологических жидкостях.
4.Понятие о супервторичной структуре белков. Основные типы надвторичных структур - структурные мотивы.
5. Фрагментация полипептидов химическими методами. Расщепление дисульфидных связей, и по остатку Met бромцианом.
6. Методы установления молекулярной массы белков.
7. Электрофоретические методы разделения белков в диагностике заболеваний.
8. Генно-инженерные методы получения белков.
9.Роль гликопротеинов в специфическом связывании лигандов. Белки-рецепторы.
10. Лекарства как лиганды, влияющие на функцию белков
11.Определение первичной структуры белков. Метод Эдмана с использованием 4 - диметиаминоазобензол - 4 – изотиоцианата.
12.Определение первичной структуры полипептидных цепей. Метод Эдмана. Секвенаторы
13. Изучение вторичной структуры белков. Обмен дейтерия, спектроскопия в ИК-области.
14.Изучение вторичной структуры белков. Вращение плоскости поляризации света и поглощение света в УФ-области спектра.
15.Третичная структура белков. Супервторичные структуры и домены
16.Структура и пространственная организация белковых молекул. Супервторичные структуры и домены
17.Четвертичная структура белков.Стехиометрическое соотношение мономеров в олигомере. Определение состава олигомера по молекулярным массам мономеров. Сшивание субьединиц бифункциональными реагентами
18.Стехиометрическое соотношение мономеров в олигомере. Электрофорез в ПААГ
19.Изучение третичной и четвертичной структуры белков. Рентгеновская и нейтронная кристаллография
20.Денатурация белков. Денатурирующие воздействия (химические физические и биологические агенты). Свойства денатурированных белков
21.Извлечение белков из клеток и тканей (предосторожности, критерии гомогенности полученных препаратов)
22.Методы разделения белков. Ионообменная и афинная хроматография
23.Методы разделения белков. Разделение субъединиц по размерам и отделение от низкомолекулярных соединений (диализ и электродиализ, гель-хроматография, электрофорез в ПААГ-ДСН)
24.Методы разделения белков. Фракционное осаждение (высаливание, разделение при низких значениях ионной силы, изоэлектрическое осаждение, разделение с помощью
органических растворителей, избирательное осаждение другими реагентами)
25.Методы разделения белков. ВЭЖХ, изоэлектрофокусирование и иммуноэлектрофорез
26. Основы фолдинга белков: роль шаперонов в формировании и поддержании нативной конформации белковых молекул.
