Микробиологические методы диагностики туберкулеза

Для подтверждения диагноза туберкулеза основное значение имеет микробиологическое исследование. В противотуберкулезном диспансере повторяют двукратную микроскопию мокроты на КУБ, если эти исследования не были сделаны в учреждениях общей лечебной сети или их результаты были отрицательными. В качестве биологического материала обычно используют мокроту, а при ее отсутствии – промывные воды бронхов и желудка.

1. Микроскопия мазков мокроты, окрашенных по Цилю–Нильсену, является наиболее простым методом выявления туберкулеза. Более информативными являются методы флотации (обогащения) и люминесцентной микроскопии, которые позволяют повысить точность бактериологического исследования.

2. Достоверным методом верификации туберкулезной этиологии процесса является культуральное исследование или посев исследуемого материала на твердую питательную среду Левенштейна–Йенсена, что позволяет идентифицировать МБТ на основании характерного внешнего вида колоний, темпа их роста и условий выращивания. Культуральное исследование выполняется только в противотуберкулезных учреждениях, так как для его проведения необходимы специально оснащенные и аттестованные бактериологические лаборатории. Культуральное исследование позволяет обнаружить МБТ даже в том случае, если в 1 мл исследуемого материала содержится всего 100 микробных тел. Недостатком культурального исследования на твердой среде Левенштейна–Йенсена является его длительность – рост колоний МБТ происходит в течение 4-8 недель.

3. Для более быстрого бактериологического исследования мокроты и другого биологического материала в лабораториях противотуберкулезных диспансеров применяется аппарат ВАСТЕС, который позволяет получить рост туберкулезных микобактерий уже через 1-2 недели. Исследуемый материал помещают в специальные пробирки с жидкой питательной средой, на дне пробирок содержится кислородзависимый флюорохромный краситель. Микобактерии размножаются и поглощают кислород, в результате чего его концентрация в пробирке снижается, и свечение красителя усиливается. Таким образом, рост МБТ вызывает усиление флюоресценции, которая становится видимой при облучении пробирки ультрафиолетовым светом. Для регистрации роста измеряют интенсивность свечения специальными фотодатчиками, встроенными в прибор. Интенсивность свечения регистрируют в единицах роста.

4. Современным методом является исследование при помощи теста Xpert MBT/RIF, который еще называют GeneXpert MTB/RIF. Это – новый генетически-молекулярный тест, который позволяет одновременно подтвердить диагноз туберкулеза в результате идентификации микобактериальной ДНК и определить устойчивость МБТ к рифампицину путем выявленияихгенетических мутаций, связанные с устойчивостью к этому препарату. Исследование проводится в специализированных противотуберкулезных учреждениях. Для теста используется образец мокроты, результаты могут быть получены менее, чем за 2 часа. Устойчивость к рифампицину свидетельствует об очень высоком риске мультирезистентного туберкулеза (МРТБ).

Исследование мокроты генетически-молекулярным тестом на ТБ и МРТБ проводится:

1. Больным, у которых в мокроте найдены КУБ (М+);

2. Всем ВИЧ-инфицированным лицам;

3. Детям 0-17 лет;

4. Лицам, которые контактировали с больным МРТБ.

Высоко чувствительной является биологическая проба, когда материалом, выделенным от больного, заражают лабораторных животных (гвинейскую свинку). Эта проба может подтвердить наличие даже одной микобактерии туберкулеза в отобранном для исследования материале. Однако биологическая проба дорогостоящая и трудоемкая, поэтому в настоящее время не используется.

Обнаружение КУБ в мазке мокроты при отсутствии изменений в легких на рентгенограммах может быть единственным проявлением туберкулеза бронха, в таких случаях необходимо выполнить бронхоскопию.