Аспирационные методы

Простейшие аспирационные методы основаны на улавливании бактерий жидкостью.

Через сосуд с определенным объемом изотонического раствора NaCl или водопроводной воды просасывают (с помощью воздуходувки, пылесоса, насоса и др.) определенный объем воздуха.

Затем проводят высев на МПА по 0,1-0,2 мл улавливающей жидкости. В случае большего объема полученной суспензии всю или часть улавливающей жидкости профильтровывают через мембранные фильтры № 2 или № 3 с последующим посевом фильтров на поверхность плотных питательных сред.

Среди приборов для исследования воздуха помещений самым распространенным является прибор Кротова. Механизм улавливания микрофлоры основывается на ударно-прибивном действии струи воздуха, который проходит через узкую клиновидную щель и с большой скоростью ударяется о влажную поверхность питательной среды. В результате удара находящиеся в воздухе аэрозоли, в том числе содержащие бактерии пылевые частицы и капли, прибиваются к поверхности МПА или элективных сред. Во время отбора пробы воздуха чашка Петри вращается вместе со столиком, благодаря чему достигается равномерное обсеменение поверхности агара микрофлорой воздуха. Для отбора проб следует подбирать чашки Петри с плоским дном, а количество питательной среды в чашке не должно превышать 15 мл.

Прибор Кротова характеризуется эффективностью улавливания микрофлоры в пылевой фазе аэрозоля, дает четкие сопоставимые результаты, прост в работе, позволяет за короткое время произвести отбор проб воздуха непосредственно на чашки Петри с МПА или элективными средами. Производительность прибора - от 20 до 40 л/мин. Основной недостаток прибора состоит в том, что он нуждается для работы в электроэнергии; это ограничивает возможности его применения для исследования атмосферного воздуха.

Для исследования атмосферного воздуха используется ряд приборов, в которых аэрозоль улавливается в жидкую среду. Принцип устройства этих приборов прост. Они представляют собой стеклянные емкости, в которых через отверстия в пробке пропущены две трубки. Одна трубка кончается чуть ниже пробки и соединена с аспиратором, другая опущена на дно цилиндра, куда поступает исследуемый воздух. В цилиндр наливают стерильный изотонический раствор хлорида натрия или водопроводную воду (жидкости, не образующие пену) и через нее просасывают определенный объем воздуха. В качестве аспиратора могут быть использованы воздуходувки, пылесосы, насос. Посев жидкости производят на питательный агар или дифференциальные среды. На МПА засевают по 0,1-0,2 мл улавливающей жидкости, а на элективные среды - по 0,3-0,5 мл.

Для исследования атмосферного воздуха используются также приборы-бактериоуловители, т.е. трубки с размещенными в них плотными фильтрами (хлопчатобумажная или стеклянная вата). После окончания отбора пробы воздуха в количестве 100-300 л ватный тампон помещают в склянку с изотоническим раствором хлорида натрия и тщательно отмывают встряхиванием со стеклянными бусами. Полученную суспензию подвергают бактериологическому анализу посевом на поверхность плотных питательных сред.

Для бактериологического исследования воздуха могут быть использованы стерилизованные и высушенные мембранные фильтры №4. При помощи воздуходувки через фильтр просасывают воздух. Мембранные фильтры должны быть хорошо просушены, так как мокрые и даже влажные фильтры практически воздухонепроницаемы. Преимуществом метода мембранных фильтров является их портативность и возможность концентрировать на них микроорганизмы из относительно больших объемов воздуха. Мембранные фильтры могут быть использованы при исследованиях атмосферного воздуха в зимних условиях.

Для обнаружения вирусов в воздухе наиболее целесообразно использовать приборы, в которых улавливание вирусного аэрозоля осуществляется в жидкой улавливающей среде.

В зависимости от поставленной задачи исследования микрофлоры воздуха и условий отбора проб могут проводиться определения общей бактериальной обсемененности воздуха, содержания санитарно-показательных микроорганизмов и наличия патогенных или условно-патогенных микроорганизмов.

Пробы воздуха следует отбирать на уровне дыхания сидящего или стоящего человека.

Задание№ 1. Определить содержание микроорганизмов в воздухе лабораторных помещений методом седиментации.