Включение прибора

1. Включить прибор в сеть.

2. Включить кнопку «Power» в положение «on» последовательно на блоке питания и блоке питания ксеноновой лампы

3. Включить управляющий компьютер

4. Дать прогреться около 30 мин.

5. Зайти в программу, выполнить инициализацию прибора.

ВЫБОР РЕЖИМОВ РЕГИСТРАЦИИ

Этот выбор включает установку длины волны возбуждения, ширины щелей монохроматоров возбуждения и флуоресценции, скорости сканирования.

Выбор ширины щелей определяется в основном интенсивностью флуоресценции. Нормальные значения от 3 до 10 нм. Следует помнить, что спектральное разрешение определяется в основном шириной щели флуоресценции и увеличивать ее более 10 нм нецелесообразно.

При проведении измерений необходимо контролировать правильность установки режимов регистрации, наличие фильтров в кюветном отделении.

ВЫПОЛНЕНИЕ РАБОТЫ

А. Исследование концентрационного тушения флуоресценции родамина B в водном растворе.

1. Тщательно промыть кювету дистиллированной водой.

2. Установить следующие режимы регистрации: щель “excitation” 3нм, щель “fluorescence”- 5нм, длина волны возбуждения “l excitation” 562 нм, скорость регистрации “medium”. Установить нулевой отсчет.

3. Снять на одном графике (один над другим) спектры флуоресценции в интервале 500-700 нм растворов родамина следующих концентрации: 0,5; 1,0; 2,5; 5,0; 10 мг/л (удобно в воду добавлять рассчитанное количество раствора родамина с концентрацией 10мг/л).

Проинтегрировав графики, построить зависимость интегральной интенсивности от концентрации. Оценить концентрацию начала тушения и среднее расстояние между молекулами при этой концентрации. Молярная масса родамина около 500г/моль.

В. Концентрационное тушение в смеси глицерин-вода. Все измерения аналогичны пункту А, только в качестве растворителя используется смесь глицерин-вода 1:1. (учитывая вязкость необходимо проводить перемешивание раствора стеклянной палочкой).

Меры предосторожности!

1. При выключении прибора сначала выключить лампу, а через полчаса отключить сам прибор.

2. Не заглядывать в кюветное отделение при проведении измерений.

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ

1. Основные параметры флуоресценции. Влияние внешней среды на эти параметры.

1) Что такое диаграмма Яблонского. Нарисовать и объяснить

2) В чем различие внутренней и интеркомбинационной конверсии

2. Принцип Франка-Кондона.

4. Устройство спектрофлуориметра. Чем определяется максимальная чувствительность регистрации?

5. Принципы тушения флуоресценции.

6. В чем сходство и различие динамического и статического тушения.

Использованная литература: