Как выполняются одношаговые исследования

АКТИВНОСТИ ФАКТОРОВ СВЕРТЫВАНИЯ?

Определение активности отдельных факторов свертывания неотделимо от решения большого количества гемостазиологических проблем, в осо­бенности в области диагностики наследственных нарушений гемостаза, ди­агностики и мониторинга приобретенных нарушений свертывания, монито­ринга заместительной терапии прокоагулянтными фракциями плазмы, а также для определения активности этих фракций при их приготовлении. Во всех этих случаях целью исследования является определение уровня сни­жения активности фактора. Однако, в настоящее время наблюдается рас­тущий интерес к определению увеличения активности фактора для оценки состояния гиперкоагуляции.

Процедура исследования

В одношаговом тестировании в одной и той же реакционной смеси проис­ходят активация факторов и образование фибрина. Для выполнения такого теста нужно иметь следующее:

• фактор-дефицитную плазму (субстратная плазма)

• исследуемый образец, контрольная или референсная плазма

• активирующий агент

• стартовый реагент.

Фактор-дефицитная плазма - это плазма, в которой отсутствует определя­емый фактор, а остальные содержатся в нормальном количестве, включая фибриноген.

В качестве тестируемого материала используется цитратная бестромбоцитная плазма. Исследования факторов выполняются только с цитратной плазмой, разведенной буферным раствором, так как в неразведенной или не­правильно разведенной плазме разница в клоттинговом времени между от­дельными шагами разведения не существует или пренебрежимо мала.

В зависимости от тестируемого фактора, исследования активности прово­дятся или с активацией внутреннего пути свертывания (АПТВ), или внешнего пути свертывания (ПВ). Исследования активности VIII, IX, XI, XII факторов про­водятся с активацией внутреннего пути (реакция АПТВ), VII фактор - с актива­цией внешнего пути (прот­ром­биновое время). II, V, Х факторы можно опреде­лять любым из этих способов.

В качестве стартового реагента используется раствор хлорида кальция. Время между добавлением стартового реагента и образованием фибрина яв­ляется основой для расчета активности соотвествующего фактора.