Конфигурации пэтч-кламп метода

Пэтч-кламп метод позволяет осуществлять также регистрацию ионных каналов и в других конфигурациях. Достигнув контакта в кон­фигурации cell attached, можно, отводя элек­трод, оттянуть участок мембраны для форми­рования inside-out (внутренняя сторона нару­жу) конфигурации (рис. 2.3С). В последнем случае цитоплазматическая сторона мембра­ны будет обращена к перфузионному раство­ру. С другой стороны, с помощью неболь­шого дополнительного присасывания можно прорвать участок мембраны, расположенный внутри регистрирующего электрода, обеспе-

чив контакт последнего с цитоплазмой клет­ки (рис. 2.3D). В этих условиях будут реги­стрироваться токи в конфигурации whole-cell (целая клетка). Наконец, после полу­чения конфигурации «целая клетка», мож­но оттянуть электрод от клетки, сформиро­вав из мембраны сначала тонкую перемыч­ку, а затем, после отделения этого участ­ка, получить конфигурацию outside-out (на­ружная сторона наружу; рис. 2.3Е). Каждая из этих конфигураций имеет свои преиму­щества, их использование зависит от типа изучаемого ионного канала и той инфор­мации, которую мы хотим получить в дан­ном эксперименте. Например, для апплика­ции веществ на внешнюю сторону мембра­ны предпочтительной является конфигурация outside-out.

Пэтч-кламп конфигурация «целая клет­ка» предполагает обмен между цитоплазмой

Глава 2. Ионные каналы и нейрональная сигнализация