Внутриклеточная микроэлектродная регистрация

До разработки пэтч-кламп метода свойства ионных каналов в клеточных мембранах ис­следовались в экспериментах, в которых для измерения мембранного потенциала или мембранного тока использовались стеклян­ные микроэлектроды. Использование Лингом иДжерардом⁷' в 1949 году стеклянных микро­электродов для внутриклеточной регистрации ионных токов в живых клетках было не менее важным событием, чем введение пэтч-кламп метода три десятилетия спустя. Этот метод обеспечивал точное измерение мембранного потенциала покоя клетки, потенциала дей­ствия, а также ответов на синаптическую активацию мышечных волокон и нейронов (глава 1).

Метод внутриклеточной регистрации про­иллюстрирован на рис. 2.5А. Острая стеклян­ная микропипетка, диаметр кончика которой не превышает 0,5 мкм, заполненная концен­трированным солевым раствором (например, 3 М КО), служит электродом и присоеди­няется к вольтметру для записи потенциала. Момент прокалывания пипеткой клеточной мембраны, приводящий к проникновению ее в клеточную цитоплазму, проявляется мгно­венным появлением потенциала, соответству­ющего мембранному потенциалу покоя. При удачном проникновении в клетку мембрана обхватывает внешнюю поверхность пипетки,

благодаря чему цитоплазма остается изолиро­ванной от внеклеточной жидкости.