Окрашивание препаратов

Простая окраска проводится одной какой-либо краской с целью определения формы микроба. Стекла с фиксированны­ми мазками помешают на мостике над сливной чашкой и покрывают рабочим растворам краски или погружают в кювет с краской. При наличии красящих бумажек их накладывают на мазки и наливают несколько капель дистиллированной воды так, что бы бумажка прилегла к стеклу, но не плавала на воде. Продолжительность окрашивания: фуксином Пфейфера, эозином, малахитовой зеленью 1-2 мин, синькой Леффлера - 3-5 мин. Затем краску сливают (или снимают бумажки) и стекла на мостике осторожно промывают дистиллированной водой, пока она не будет стекать бесцветной. Смывать краску можно и в кюветах, или стаканах, меняя воду до ее обесцвечивания. Препараты подсушивают осторожно между листами фильтровальной бумаги или на воздухе.

Лабораторный работник должен точно знать оптимальный режимы окрашивание при сложных методах окраски. Эти методы применяют для обнаружения капсул, спор, жгутиков а также для выявления способности микробов фиксировать некоторые краски, что имеет определенное значение при идентификации микробов.

Окраска по Граму. Все бактерии по отношению к этой окраске разделяют на грамположительные, окрашивающиеся генцианвиолетом в фиолетовый цвет, и грамотрицательные, обесцвечиваемые спиртом и воспринимающие дополнительную, контрастную (розовую) окраску.

На мазок накладывают полоску фильтровальной бумаги и наливают на нее рабочий раствор генцианвиолета. Если есть готовые бумажки, пропитанные этой краской, то их кладут на мазки матовой стороной вверх и наливают несколько капель воды. Через 2 мин бумажки снимают, краску сливают (не промывают) а на препарат наносят раствор Люголя на 1 мин (до почернения мазка), после чего раствор сливают, а мазок обесцвечивают этиловым спиртам до прекращения отхождения краски ( около 30 с). Затем мазок промывают водой и, стряхнув воду, докрашивают мазок фуксином Пфейфера 30-60 с. или сафронитом 2 мин.

Надо строго соблюдать определенные сроки обработки препарата, особенно спиртом: при его передержке можно обесцветить и грамположительные микробы.