Тонкослойная гель-фильтрация

Вместо цилиндрической колонки матрицу пористого геля можно нанести тонким слоем на стеклянную пластинку и вести элюцию током жидкости, текущей вдоль пластинки с одинаковой скоростью по всей ширине. Такое течение можно осуществить в наклоненной под небольшим углом пластинке, на концы которой равномерно наложены фитили из фильтровальной бумаги, погруженные с другой стороны в резервуары с элюентом (рисунок 3) [1].

Рисунок 3. Схема прибора для гель-фильтрации в тонком слое

1-столик, 2- прозрачная крышка, 3-пластинка, 4-резиновая вставка [1]

Достоинствами тонкослойной гель-фильтрации являются быстрое разделение, высокая чувствительность, простое оборудование, легкое элюирование и способность заменять хроматографию на бумаге в качестве аналитического метода. Основным преимуществом тонкослойной гель-фильтрации перед гель-фильтрацией на колонке является то, что она позволяет хроматографировать в одинаковых условиях несколько проб, а также разделять очень малые количества материала [3]. Тонкослойная гель-фильтрация применяется для белков, пептидов, нуклеиновых кислот, нуклеотидов и других гидрофильных веществ с высокой молекулярной массой. Наибольшую ценность она представляет для определения молекулярной массы белков и пептидов. Метод позволяет получить весьма точные значения. Тонкослойная гель-фильтрация находит применение в клинической диагностике для определения патологических белков в сыворотке крови, моче, спинномозговой жидкости. Метод используется и для проверки чистоты белков, ферментов [4].