Определение лактозы цианидным методом

Проведение испытаний. В мерную колбу на 250 см3 помещают 25 г гомогенизированного навески (25 см3 раствора), взвешенной с погрешностью не более 0,01 г. Остатки навески с посуды, в которую ее брали, и воронки смывают водой в ту же колбу. Общее количество воды должно быть не более половины объема колбы. Колбу помещают в водяную баню с тем­пературой 60 °С и выдерживают 15 мин, периодически помешивая, затем охлаждают до комнатной температуры, добавляют 3 см3 20 %-ный раствора сернокислого цинка и 1,5 см3 2,5 н раствора гидроокиси натрия для осаждения несахаров. Содержимое колбы 2...3 мин встря­хивают, затем доводят до метки, перемешивают, дают, отстояться в течение 3...5 мин и фильтруют через складчатый фильтр в сухую колбу. В фильтрате определяют редуцирующие сахара (лактозу) ускоренным цианидным методом (4.2.1.2).

Содержание лактозы (Х), в процентах определяют по формуле:

, (4.10)

где 0,012 – масса лактозы, необходимая для восстановления 10 мл 1% раствора гексацианоферрата калия, г; V –объем колбы в которой растворена навеска, мл; V 1 – объем фильтрата, израсходованный для титрования раствора гексацианоферрата калия, мл;; m1 – навеса, г; К – коэффициент учитывающий объем осадка(для супов –0,985, каш –0,974, молока- 0996).

Объем молока (Х мл) в изделии рассчитывают по формуле

Х = 100 m/ 4,7,

где m – масса лактозы, г; 4,7 – минимальное содержание лактозы в молоке, г/100 мл.

4. 3 Колориметрический гексацианоферратный метод определения редуцирующих сахаров

Метод основан на колориметрировании избытка щелочного раствора гексацианоферрата (III) калия после реакции с редуцирующими сахарами объекта исследования. При этом гексацианоферрат (III) восстанавливается до гексацианоферрата (II), что ведет к ослаблению окраски, так как гексацианоферрата (III) калия окрашен значительно интенсивнее, чем гексацианоферрат (II).

Реактивы: глюкоза кристаллическая гидратная; гексацианоферрат (III) калия; гидроксид калия или натрия раствор 2,0 М и 1,25 М; кислота хлороводородная 1М раствор; натрия хлорид; метиленовый голубой; сахароза или сахар-рафинад; сульфат цинка 0,5М раствор.

Материалы, оборудование: фотоэлектроколориметр (ФЭК), плита электрическая, ступки фарфоровые, фильтры бумажные, баня водяная, пипетки, конические колбы вместимостью 100-150 см3, колбы мерные на 250 и 1000 см3,


Понравилась статья? Добавь ее в закладку (CTRL+D) и не забудь поделиться с друзьями:  



double arrow
Сейчас читают про: