2015-09-06
287
Живильне середовище, яке не містить термолабільних компонентів, стерилізують автоклавуванням в автоклавах при тиску 0,75 – 1 атм, та температурі 115° - 120° С. Тривалість стерилізації залежить від об’єму середовища у посудині. При об’ємі 25 – 50 мл стерилізують протягом 15 – 20 хвилин, а 2 – 4 л – протягом 30 – 40 хвилин (табл. 2).
Таблиця 2
Час стерилізації живильного середовища
| Об’єм на посудину, мл | Час стерилізації, при 121°С (1атм), хв. |
| 20-50 250-500 |
Для стерилізації середовищ із термолабільними сполуками (рослинні екстракти, білки, амінокислоти, антибіотики, деякі стимулятори росту), які руйнуються при автоклавуванні, застосовують метод холодної стерилізації. Для цього термолабільну речовину обробляють етиловим ефіром, який потім видаляють при температурі -30° С, а твердий залишок розчиняють у стерильній воді і в стерильних умовах додають до решти простерилізованого
раніше середовища. Другий спосіб полягає у фільтруванні розчинів через стерильні мікроскопічні фільтри, які адсорбують віруси і бактерії. Для цього використовують різні типи бактеріальних фільтрів: фільтр Беркефельда, фільтр Зейтца.
В останні роки широкої відомості набули мілліпорові мембранні фільтри, що випускають у США. Вони складаються із біологічно інертної суміші целюлози та інших полімерних матеріалів і мають розміри пор від 14 тис. нм до 25 нм.
Простерилізовані одним з методів термолабільні речовини у стерильних умовах додають до простерилізованого раніше живильного середовища.
Також для стерилізації води і середовищ можна використовувати мікрохвильову піч: мікрохвилі прогрівають внутрішньоклітинну воду мікроорганізмів і вони гинуть при 100° С.
