Проба на редуктазу є непрямим показником бактеріального забруднення, який ґрунтується на біохімічній активності мікроорганізмів.
Про кількість бактерій у молоці можна судити по наявності фермента редуктази, який виділяють бактерії в процесі життєдіяльності. Редуктаза здатна знебарвлювати добавлені в молоко слабкі органічні барвники - метиленову синь чи резазурін. Знебарвлення проходить тим швидше, чим більше в молоці редуктази, а отже і бактерій.
Основний розчин резазурину натрієвої солі готують так: 100 мг резазурину натрієвої солі переносять у мірну колбу на 200 мл і доводять до мітки прокип'яченою і охолодженою до 25 °С дистильованою водою. Суміш старанно перемішують. Строк зберігання основного розчину резазурину натрієвої солі – не більше 30 діб при температурі 8-10 °С.
Робочий розчин резазурину готують розведенням основного розчину прокип'яченою і охолодженою до 25 °С дистильованою водою у співвідношенні 1:2,5 (наприклад, до 10 мл основного розчину додають 25 мл води). Масова частка резазурину в робочому розчині становить 0,014%.
|
|
При використанні резазурину в таблетках для приготування робочого розчину одну таблетку розчиняють у 50 мл прокип'яченої і охолодженої до 25°С дистильованої води. Масова частка резазурину в робочому розчині становить 0,01 %. Строк зберігання робочого розчину резазурину – не більше 3 діб при температурі 0-5°С. Основний і робочий розчини зберігають у склянках, захищених від світла.
Хід визначення. Пробу з резазурином слід проводити не раніше як через 2 год. після доїння. У пробірки наливають по 1 мл робочого розчину резазурину і по 10 мл досліджуваного молока, закривають гумовими корками і змішують повільним триразовим перевертанням пробірок. Останні переносять у редуктазник з температурою води 37°С. Вода в редуктазнику або водяній бані після занурення пробірок із молоком повинна бути на рівні або трохи вище рівня рідини в пробірках. Початком аналізу вважають час занурення пробірок у редуктазник. Показники враховують через 1 і 1,5 год. Пробірки з молоком, які через 1 год. мають забарвлення від сіро-бузкового до бузкового з сірим відтінком, залишають ще на 30 хв.
Залежно від тривалості знебарвлення або зміни кольору, визначають клас молока згідно з вимогами, наведеними в таблиці 5.
Таблиця 5
Кількість бактерій у молоці за редуктазною пробою з резазурином
Клас молока | Тривалість знебарвлення або зміни кольору, год. | Забарвлення молока | Орієнтовна кількість бактерій в 1 мл молока |
Вищий | 1,5 | Сіро-бузкове до бузкового з сірим відтінком | до 300 тис. |
Перший | Сіро-бузкове до бузкового з світло-сірим відтінком | від 300 тис. до 500 тис. | |
Другий | Бузкове з рожевим відтінком або яскраво-рожеве | від 500 тис. до 4 млн. | |
Третій | Світло-рожеве або біле | від 4 млн. до 20 млн. |