2020-01-14
123
При осуществлении типичного теста, сыворотку пациента инкубируют с антигенными субстратами (ткань печени или почек животных, культура клеток Hep-2) для осуществления специфического связывания имеющихся в сыворотке антител с клеточными ядрами клеток. После отмывания несвязавщихся белков сыворотки, субстрат инкубируют с антителами против человеческих иммуноглобулинов. Поскольку вносимые антитела коньюгированы с флуоресцирующим веществом, при наличии в сыворотке антител к ядерным антигенам образовавшийся комплекс (ядерный антиген + антиядерные антитела сыворотки + антитела к антителам человека + флюоресцирующее вещество) можно выявить при люминесцентной микроскопии. Характер свечения - периферический, диффузный, крапчатый и т.д. позволяет выявить связь с конкретными внутриядерными структурами см. Таблицу 7:
Таблица 7. Оценка результатов определения ANA в реакции непрямой иммунофлуоресценции.
| Характер свечения | Антигенная специфичность | Клиническое значение | ||
| Периферическое или краевое | dsDNA, lamins. nuclear pore complexes | Первичная СКВ | ||
| Гомогенное (диффузное)
| dsDNA | Специфичность 20 - 40 % при активной СКВ, вовлеченность ЦНС и почек | ||
| Гистоны | Идиопатическая СКВ- 50 -70 %, лекарственная СКВ - 95%, локальная склеродерма | |||
| Крапчатость: грубая | U1-RNP | СКВ 20%-40%: C<CNr > 95% | ||
| SM | Маркер СКВ 15%-30% | |||
| Тонкая (пылевидная) | SS-A(Ro) | СКВ 24%-60%; волчанка новорожденных > 90%: Дефицит комплемента (C2 and C4)/LE > 90%; Синдром Шагрена 85%-95% | ||
| SS-B (La) | СКВ 9%-35%; волчанка новорожденных 75%; Синдром Шегрена 70%-85% | |||
| DNA-polymerase | СКВ 3% | |||
| Mi-2 | Дерматомиозит (DM) 15%-35%: Полимиозит (PM) 5%-9% | |||
| дискретная | Белок центромер - включения схожие по размеру и количеству | Ограниченная склеродермия 60%-80%: dilluse scleroderma - 8%; Синдром Рейно 25%; ПСС -КРЕСТ 50%-70% | ||
| NSP-1(pseudo АСА) -включения различного размера и количества | Ревматические заболевания и хронические болезни печени | |||
| Внутриядерное свечение Типа "Clumpy" | Фибрилларин (U3 RNP) | ПСС 6%-8%; dilluse scleroderma - 5%: КРЕСТ - 10% | ||
| Крапчатое | RNA-polymerase 1 | ПСС 4%-20%; dilluse scleroderma -13% | ||
| Гомогенность: (нуклеолы/нуклеоплазма) | ||||
| Слабая крапчатость нулеол) / вид "матового стекла" нуклеоплазмы | DNA-topoisomerase 1 (Scl-70) | ПСС 4%-20%; dilluse scleroderma -13%: | ||
| Сильное гомогенное свечение нуклеол / слабое гомогенное свечение нуклеоплазмы | PM-ScI | PM/ПСС - 24% | ||
| Сильное гомогенное свечение нуклеол и нуклеоплазмы | Ku | Scleroderma 1%-14%; PM/ScI 26%-55%; SLE 1%-19%; Sjogren's syndrome - 20% | ||
| Крапчатое свечение цитоплазмы | Jo-1 (histidyl tRNA synthetase) PL-7 (threonyl tRNA synthetase) PL12 (alanyl tRNA synthetase) | PM 18%-36%; DM - 13%; PM/DM - 43% PM/DM 3%-5% PM/DM - 3% |
