Коллоидно-осадочные пробы

Одним из способов оценки белковосинтезирующей функции печени является проведение коллоидно-осадочных проб. Данный метод диагностики нашел широкое применение не только в гуманной, но и в ветеринарной медицине. В его основе лежит зависимость коллоидной устойчивости сыворотки крови к воздействию химических реагентов от соотношения белковых фракций – альбуминов и глобулинов. При поражении печени происходит нарушение синтеза альбуминов в гепатоцитах, что вызывает развитие диспротеинемии – нарушение нормального соотношения между белковыми фракциями сыворотки крови.

В качестве химических коагулирующих веществ были предложены сулема, тимол, сульфат меди, сульфат цинка.

Проба с раствором сульфата меди по Постникову В.С.

Реактивы. 1. 1 %-ный раствор меди сульфата; рабочий раствор меди сульфата следующим образом: в мерной колбе на 100 мл растворяют в дистиллированной воде 0,5 г натрия сульфата, затем вносят туда же 7 мл 1 %-ного раствора меди сульфата и доводят до метки водой.

Оборудование. Химические стаканчики на 50 мл, микробюретки на 2 или 5 мл, пипетки, мерные колбы.

Ход определения. В пробирку вносят 1 мл свежей сыворотки крови. По каплям из микробюретки добавляют рабочий раствор меди сульфата до появления помутнения, не исчезающего при помутнении.

Клиническое значение. В норме для достижения стойкого помутнения для сыворотки КРС необходимо 2,1-2,3 мл рабочего раствора, при этом результаты пробы являются отрицательными. При нарушении белковосинтезирующей функции печени результаты пробы оцениваются следующим образом: при помутнении крови от добавления от 1,86 до 2,08 мл реактива – реакция слабоположительная (+); от 1,76 до 1,85 мл – положительная (++); менее 1,75 мл – резко положительная (+++).

Формоловая проба

Принцип. Суть пробы заключается в желатировании белков сыворотки крови при повышении содержании глобулинов (особенно гамма-глобулинов) и фибриногена после взаимодействия с формалином.

Реактивы. 40 %-ный раствор формальдегида.

Оборудование. Пробирки, пипетки, пробки.

Ход определения. В пробирку вносят 1 мл свежей сыворотки крови и добавляют 2-3 капли формальдегида. Смесь перемешивают, пробирки закрывают резиновыми пробками и оставляют при комнатной температуре на 24 часа.

Клиническое значение. Проба считается отрицательной, если за это время образование сгустка не происходит. Если образуется незначительный сгусток, пробу считают сомнительной (+); образование плотного сгустка без изменения цвета – слабоположительная реакция (++); появление опалисцирующей окраски и плотного сгустка – положительная реакция (+++); интенсивное молочно-белое окрашивание и плотный сгусток характерны для резкоположительной реакции (++++).

Проба Вальтмана (в модификации Тейфля)

Принцип. При добавлении к сыворотке крови раствора кальция хлорида в нагретом состоянии происходит нарушение коллоидной устойчивости белков.

Реактивы. 0,5 %-ный раствор кальция хлорида: готовят путем разведения 10 %-ного ампульного раствора кальция хлорида.

Оборудование. Спиртовка, пробирки, мерные колбы, пипетки на 0,1; 0,2; и 5 мл.

Ход определения. В пробирке смешивают 0,1 мл сыворотки крови (свежая и без следов гемолиза!) с 4,9 мл воды и добавляют 0,1 мл 0,5 %-ного раствора кальция хлорида. Содержимое пробирки встряхивают и доводят до кипения. После этого пробирку охлаждают и осматривают против света. При отсутствии хлопьев к пробе доливают еще 0,1 мл 0,5 %-ного раствора кальция хлорида и снова кипятят. Реакцию повторяют до появления хлопьев в пробирке.

Клиническое значение. Результаты реакции оценивают по количеству затраченного 0,5 %-ного раствора кальция хлорида. В норме коагуляция белков сыворотки крови наступает при добавлении 0,4-0,5 мл раствора кальция хлорида. Если для образования хлопьев расходуется менее 0,4 мл реактива – это характерно для развития гепатодистрофии, цирроза печени, хронической пневмонии.

Затрачивание на титрование более 0,5 мл раствора хлористого кальция свидетельствует о повышении альфа-глобулинов, что отмечается при острых воспалительных процессах (нефриты, пневмонии, перитонит и т.д.)

Цинк-сульфатная печеночная проба по И.П. Кондрахину

Принцип. Сульфат цинка вызывает коагуляцию белков сыворотки крови и ее помутнение. Скорость этого процесса зависит от содержания в ней альбуминов и глобулинов, а так же патологических белков – параглобулинов. Чем выраженнее снижение уровня альбуминов, тем быстрее происходит коагуляция белков и помутнение сыворотки.

Реактивы. 1. Цинка сульфат семиводный (готовят водный раствор с соответствующей концентрацией в зависимости от вида животного); для исследования сыворотки взрослого крупного рогатого скота применяют 55 мг%-ный раствор: 55 мг сульфата цинка вносят в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки дистиллированной водой; для исследования сыворотки свиней готовят 100 мг%-ный раствор; при исследовании сыворотки крови кур-несушек применяют 110 мг%-ный раствор; для оценки сыворотки лошадей – 125 мг%-ный раствор.

2. Натрия хлорид 0,9 % раствор: 9 г натрия хлорида вносят в мерную колбу на 1 литр и доводят до метки дистиллированной водой.

Оборудование. Химические стаканчики на 50 мл, микробюретки на 2 или 5 мл, пипетки, мерные колбы.

Ход определения. В стаканчик вносят 1 мл 0,9 % раствора натрия хлорида и 0,5 мл сыворотки крови. Смешивают. Затем медленно по каплям, постоянно помешивая, добавляют из микробюретки раствор сульфата цинка соответствующей концентрации до тех пор, пока через вертикальный слой жидкости нельзя будет прочитать стандартный газетный шрифт. Нормальные величины для всех животных составляют 1,6-1,8 мл.

Клиническое значение. Затрата на титрование менее 1,6 мл раствора цинка сульфата свидетельствует о развитии дистрофических процессов в печени, которые более выражены при пониженных значениях.

 Оценка углеводной функции печени